离子交换层析原理步骤详细讲解.pptVIP

一、操作注意点： 1、装柱和加样同凝胶层析 2、洗脱液（NaOH和柠檬酸）别混淆 3、控制流速：20滴/min 指出2个洗脱峰分别出现在几号管？ 分别是哪个氨基酸？ 三、结果要求： 离子交换层析ion exchange chromatography 一、原理 离子交换层析是用离子交换剂（具有离子交换性能的物质）作固定相，利用它与流动相中的某种离子进行可逆的交换性质来分离子型混合物的层析方法 低盐 高盐 分离结束 去吸附 带电荷 不同蛋白质在特定pH值下有不同带电特性 胶体 洗脱 与树脂结合力 离子交换树脂如何分离蛋白质 二、离子交换剂的类型 在惰性载体上引入带有电荷的活性基团 （一）按活性功能基团带电荷性质不同 阳离子交换剂 —— 带负电荷，与阳离子交换 阴离子交换剂 ——带正电荷，与阴离子交换 阴离子交换树脂对化学试剂及热都不如阳离子交换树脂稳定。 胶体 胶体 1.离子交换树脂： (1)类型 聚苯乙烯树脂： （二）按载体种类不同 苯乙烯 二乙烯苯 聚苯乙烯 母体 交联剂 聚丙烯酸—阳离子交换树脂 甲基丙烯酸 二乙烯苯 特点：高交换量 pH8 羧基不完全解离 （2）离子交换树脂的性质 ①、一般离子交换剂的特性 多孔性：疏松、多孔网状，活性基团在网孔内 不溶性：不溶于稀酸、稀碱、有机溶剂 稳定性： 离子交换性：具相当数量的可交换或