PI3K%2fAkt%2fNF-κB介导的FSH对上皮性卵巢癌细胞增殖和侵袭机制研析.pdf

¨、 ◇。，、： 中文摘要 ㈣『『|ff舢删㈣fffIf删flffl4 Y1 80188百 PI 3K／Akt／NF-KB介导的FSH对上皮性卵巢癌细胞熠殖与侵 袭机制的研究 摘 要 目的：卵巢恶性肿瘤是女性生殖器官三大恶性肿瘤之一，其早期诊断 率低，中晚期转移率高，预后较差。对于卵巢癌发病机理的研究仍有许多 问题有待于解决。近年来越来越多的证据表明，卵巢癌的发生和进展与其 所处的激素环境有关。绝经，排卵多或不孕治疗时过量卵泡刺激素(FSH) 刺激可能是卵巢癌发生的重要危险因素。多项研究显示FSH作用于细胞表 面FSH受体激活胞内信号传导通路发挥作用，而其具体作用机制尚不清 发展、凋亡、血管生成、转移及耐药等方面起着重要的作用。可被P13K／AKT 通路直接或间接影响的下游分子主要包括细胞增殖和蛋白合成的相关因 子和一些凋亡相关因子。核转录因子(NF．KB)作为信号传导通路的中枢， 是AKT重要的下游分子之一，其异常活化可调节与细胞增殖和凋亡有关 的基因转录，溶解细胞外间质促进肿瘤细胞的浸润和转移。因此，本实验 皮性癌细胞发生增殖和侵袭的机制，以及阻断该通路对卵巢癌恶性进展的 影响，拟为卵巢癌的发病机制和基因治疗提供新的实验依据。 培养基中常规培养，待细胞进入对数生长期后用于实验。 照相。 2 (MTT)法检测药物对细胞的生长促进作用及分析其与时间和浓度之间 的关系。 3Western 中文摘要 的表达，以及细胞核与细胞浆中NF．kappaB蛋白的表达差异。 4 待细胞贴壁后，用FSH40mIU／ml和LY294002 101amol／L分别及序贯联合 作用于细胞，48小时后结晶紫染色，显微镜下观察上层小室底部穿过的 细胞情况并计数。 5应用SPSSl3．0统计软件进行统计学分析。 结果： 时间延长，浓度增加，细胞形态稍变长，生长速度和密集度明显增加。经 速度和密集度减低。单独LY294002作用后部分细胞形状由梭形变为圆形， 然后细胞开始皱缩，细胞增长能力减弱。 40mIU／ml作用48 24h、48h、72h)，MTT结果显示SKOV-3细胞于FSH 之间相比则无差异(PO．05)。3AO于FSH 长最快，与其他浓度和时间点进行统计学比较均有显著差异(P0．05)。 3Western 白表达四组间均无差异(PO．05)。NF．KB总蛋白在三个实验组中表达与 组(PO．05)。胞核中NF．KB蛋白表达FSH组与对照组相比表达增加 者比较无差异(PO．05)。胞浆中NF．KB蛋白三个实验组与对照组相比 中文摘要 组及LY294002组各组中胞核与胞浆的比值进行统计学分析，四组间有显 取蛋白中NF．K NF．K 与对照组比较表达减少，但无统计学差异(P0．05)，且其两组间比较亦 无差异(PO．05)；胞浆中NF．K FSH／LY294002组与LY294002组比较无差异(PO．05)。 4 组的两种细胞穿过小室的细胞数均明显少于对照组(P0．05)，但两组相 相比，3AO明显多于SKOV-3。 结论： 1卵泡刺激素有促进上皮性卵巢癌细胞株SKOV-3、3AO增殖作用， 提示增殖峰最高时的浓度可能是最强作用浓度。 2 而诱导其下游分子NF．KB蛋白在细胞核中表达增加，促进细胞增殖，增 加肿瘤细胞侵袭能力。 3 中文摘要