烟酰胺对非聚焦超声杀伤GLC-82肺腺癌细胞增敏作用的实验的研究.pdfVIP

硕士擘住论文 烟酰胺对非聚焦超声杀伤GLC．82肺腺癌细 胞增敏作用的实验研究 硕士研究生：郭健莲 指导老师：申洪教授 摘要 focused 研究背景：高强度聚焦超声(highintensity 国内外兴起的非侵入性肿瘤治疗新技术，大量的实验和临床研究都显示HIFU在 临床应用有较好的潜力。研究表明，超声损伤组织和细胞的主要机制是机械效 应、热效应和空化效应，超声波的空化效应和热效应所引起的生物效应，可以 改变细胞膜的脂质双分子层结构，增加细胞膜的流动性和通透性，甚至导致细 胞膜破裂，损伤Dn睑和其他结构，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，增加化疗药 物对细胞的毒性。然而HIFU只适应于肿块边界明确的病变，当肿瘤细胞位于胸 水或腹水中时，或肿瘤细胞弥漫浸润时，聚焦超声由于无法确定聚焦靶点而难 Ultrasound，NFu) 以杀净其中的癌细胞。我们采用非聚焦超声(Non．Focused 来解决这一问题，目前国内外尚未见文献探讨这一问题。 但是非聚焦超声的作用强度有限。单纯提高超声的剂量，会增加非聚焦超 声对组织的弥漫损伤作用，能否通过增加肿瘤细胞对超声的敏感性来解决这一 问题呢?我们对这一问题进行了探讨。辐射增敏剂烟酰胺可增加癌细胞对射线 的敏感性及阻碍癌细胞DNA损伤后的修复。如果我们用烟酰胺的这一特性来 将其作为超声杀伤癌细胞的增敏剂，则不仅能够增加癌细胞对超声的敏感性， 而且当超声损伤癌细胞DNA后，烟酰胺可以进一步阻止癌细胞DNA修复，与 超声产生协同作用，从而增强超声杀灭癌细胞的作用，产生增敏效果。这一增 中文摘要 敏作用不但有可能提高超声灭杀癌细胞的效果，也可使小剂量超声治疗恶性肿 瘤成为可能，并减少对正常组织的损伤。因此能否将烟酰胺作为增强超声杀伤 癌细胞的增敏剂呢?国内外尚未见相应研究报道。 目的和意义：本课题旨在探讨烟酰胺是否能够提高癌细胞对超声波杀伤的敏感 性，从而提高非聚焦超声灭杀癌细胞的能力，达到杀灭组织中，特别是胸水和 腹水中弥漫分布的癌细胞的目的。在此基础上进一步探讨其增敏原理，为基于 烟酰胺增敏的肺癌治疗奠定基础。 材料与方法： 一、非聚焦超声对悬液中人GLC．82肺腺癌细胞杀伤的实验研究 实验分组： 1、剂量分组：实验分为五组，非聚焦超声的作用强度分别为0W／cm2、20 s。 8、5s、 2、作用时间分组：实验分为五组，非聚焦超声的作用时间分别为0 10s、15s、20 s五个不同作用时间，作用强度均为20W／cm2。 实验方法：台盼蓝拒染法测NFU辐照GLC．82肺腺癌细胞后细胞的即刻存 活率；MTT法检测NFU作用后24 h细胞的存活率；流式细胞仪检测细胞周期 和凋亡率。 二、烟酰胺对人GLc-82肺腺癌细胞体外作用的实验研究 实验分为A、B、C、D、E、F六组，其中A组为未加烟酰胺的正常细胞； B、C、D、E、F组烟酰胺的浓度分别为1 mg／ml、2mg／ml、3mg／ml、4 mg／ml、 5mg／ml五个不同剂量。 实验方法：荧光显微镜观察细胞形态的变化；MTT法检测不同浓度烟酰胺 培养细胞后细胞的存活率；划痕试验检测不同浓度的烟酰胺对细胞愈合力的影 响；流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。 Il 硕