利用PCR-DGGE分析未开发油气田地表微生物群落结构.pdf

第 33卷第 1期 环 境 科 学 VoI．33．No．1 2012年 1月 Jan．，2012 ENVIRONMENTAL SCIENCE 利用 PCR-DGGE分析未开发油气 田地表微生物群落 结构 满鹏 ，齐鸿雁 ，呼庆，马安周 ，白志辉 ，庄国强 (中国科学院生态环境研究中心环境生物技术研究室 ，北京 100085) 摘要 ：利用 PCR—DGGE和克隆测序技术 ，分别对未开发油 田、气 田和非油气 田对照区域 ，地表 30、60、100、150、200cm深度 的土壤微生物分布进行研究 ，目的在于 了解未开发油气 田区域土壤微生物 的分布特征，寻找潜在 的油气资源指示菌 ．结果表 明，不同深度土壤样品间的菌群相似度很低 (26～69．9)．在 150cm和 200em处，DGGE图谱具有更好 的丰富度(≥19)、多样 性 (≥2．69)和 均匀 度 (≥0．90)．油 田 区域 富含 Y—Proteobacteria (75％)，此 外还 包 括 a—Proteobacteria、Actinobacteria、 Acidobacteria，其相似菌株 主要 为石 油相 关菌 和烃 降解 菌，如食 烷菌 、噬 甲基 菌．气 田含 有 、卢、．y、6-Proteobacteria和 Bacteroidetes，y—Proteobacteria含量较小(24％)，所获16SrDNA条带相似菌株大多不具有烃 降解能力，部分具有甲烷相关性，如 甲基孢囊菌 ．在此类研究中，150cm、200cm更适于作为统一取样深度进行大范围取样调查 ；甲基孢囊菌可用来作为潜在 的 气 田指示菌，食烷菌和噬甲基菌可作为潜在的油田指示菌 ，但仍需进一步地大范围取样验证． 关键词 ：未开发油气 田；PCR—DGGE；16SrDNA；微生物多样性 ；指示性微生物 中图分类号 ：X172 文献标 识码：A 文章编号 ：0250．3301(2O12)01．0305．09 M icrobialCommunity StructureAnalysisofUnexploited Oiland GasFieldsby PCR．DGGE MANPeng，Q1Hong-yan，HUQing，MAAn—zhou，BAIZhi·hui，ZHUANGGuo—qiang (DepartmentofEnvironmentalBiotechnology，ResearchCenterforEco—EnvironmentalSciences，ChineseAcademyofSciences，Beijing 100085，China) Abstract：Microbialcommunitiesofdifferentdepths(30，60，100，150，200cm)fromtheunexploitedoilfield，gasfieldandcontrol areawerestudiedbyPCR—DGC~Eandsequencingmethods．Theobjectivesofthisstudyweretounderstandthemicrobialdistributionin theregionsofunexploitedoilandgasfields，andtoinvestigatethepotentialmicrobialindicatorsofoilandgasresources．Theresults showedthattheDicecoefficientsbetweendifferentdepthswereverylow (26—69．9)．Themicrobialcommunitiesinthesoilof150cm and200emdepthhadgreaterrichness(S≥19)，diversity (H≥2．69)andevenness(E≥0．90)．Theresultsofsequencing demonstrated thatthebandsfrom oilfieldweremainly grouped intoOt—Proteobacteria， 一Proteobacteria，Actinobacteria，Acido