frmd4a在鳞癌中的表达和作用机制的研究.pdfVIP

黟 —R—M一D一4一A 一舌 一矬 一啊哪 一在 一鲥黼黼 一㈣ 研究 硕士研究生：郑相淮 指导教师：赵建江教授 摘 要 口腔鳞状细胞癌是最常见的口腔颌面部恶性肿瘤，其中又以舌鳞癌最为常 见。舌鳞癌恶性程度高，易复发转移。肿瘤的复发和转移是肿瘤患者预后不佳 的重要因素，因此对肿瘤侵袭转移机制的研究将会为肿瘤的治疗及改善患者预 后提供重要的依据【l】。 分子生物学和基因工程技术的进步为肿瘤的生物治疗创造了良好的基础， 生物治疗有望成为继手术、化疗、放疗后的第四种治疗方向[2】。肿瘤免疫治疗和 肿瘤基因治疗是肿瘤生物治疗的主要手段。基因治疗是随着DNA重组技术的成 熟而发展起来的，是以改变人的遗传物质为基础的生物医学治疗技术，它是通 过一定方式将人正常基因或有治疗作用的DNA序列导入人体靶细胞去纠正基因 缺陷以发挥治疗作用。虽然现在己经发现了与口腔鳞癌发生、发展有关的多种 基因，但人们仍在继续找寻与口腔鳞癌相关的新基因，尝试建立与口腔鳞癌相 关的特异性基因谱学，寻找基因治疗的靶点，为口腔鳞癌的治疗提供科学的理 论和实验依据。 口腔鳞癌的复发转移是一个多步骤且复杂的过程。肿瘤细胞从原发部位游 离是转移的最初始步骤，也是发生转移的先决条件。因此，如果能制止这一过 程的发生，将有可能从源头上控制肿瘤的转移。 2012年，Stephen等研究发现一种名为FRⅣD4A(FERMdomaill—containiIlg proteiIl4A)的蛋白在头颈癌中起着关键作用，F砌∞4A蛋白能促进癌细胞生长， 中文摘要 并且FRMD4A蛋白的高表达与头颈部鳞状细胞癌复发转移风险高度相关【31。因 而，我们推测FI洲D4A蛋白也可能在口腔鳞癌侵袭转移中发挥重要作用， FRMD4A蛋白极有可能成为口腔鳞癌新的治疗靶点。 长期以来，有关F肼D4A的研究鲜见报道，因而对其结构、功能等方面的 了解甚少，但近年来随着研究的深入，F则D4A逐渐得到广泛关注，FI蝴D4A 基因是近年来被克隆鉴定的新基因，位于人类染色体lOpl3【41。FI洲D4A基因表 个氨基酸，是一类具有FEIW结构域的蛋白【4】。FE刚结构域的命名即来源于 4．1是最先被确定的含FERM 与膜突蛋白(moesill)这4种蛋白的首字母。Band 结构域蛋白，发挥连接细胞质膜与细胞骨架，协助维持细胞形态和膜稳定性的 作用。而其他3个成员主要存在于上皮细胞富含肌动蛋白的皮层区域和细胞的 外膜，参与细胞形态构建、细胞黏附和迁移，调节膜蛋白的定位及其相关功能， 调控细胞骨架排布，并参与肿瘤侵袭与转移。FE蹦结构域广泛存在于动物细 胞多种蛋白中，可作为上游信号，被激活后释放FERM蛋白活性位点，通过 FE蹦结合不同配体或调节蛋白其他结构域结合下游信号分子，参与多种细胞 形态调节和信息传递；或只依赖自身作用于下游因子，积极广泛地影响多种细胞 生理和病理进程，含FElw结构域蛋白在参与结构组成、蛋白转移和信号转导 等功能调控中发挥着重要作用，与肿瘤的发生发展及侵袭转移密切相关【5】。2008 年的全基因组关联性研究【6】以及2012年在亚洲人群中大规模的全基因组关联研 究均发现FRMD4A基因在人体对药物依赖性方面发挥着重要作用【7】。2010年 [8】 o 降低含FEIm结构域蛋白活性的研究已有报道，如应用siI矾A干扰FAK基 可减少免疫抑制治疗常见的副作用【l01。RNA干扰是一种内源基因沉默机制，由 双链IⅢA介导，能特异性地抑制同源基因的表达，最终致使基因沉默【11】。RNA II 硕士学位论文 干扰具有高效、稳定、特异性强等特点，己成为目前生物医学研究领域最活跃 的热点之一。 目前，关于FI洲D4A在舌鳞癌中的表达情况和作用在国内外尚未见报道。 本实验首次