实验性根尖周炎根尖周组织中CGRP免疫阳性纤维变化的研究.pdfVIP

口 中文 摘 要 前 言 中最丰富的神经肤，它可以单独存在或与 PICGRPJZ*篡神经元上，广泛分布在中枢和外周神经系 统及某些神经组织中，有报道表明CGRP从感觉神经末梢释放并 对组织的血流调节、炎症及免疫反应等起着重要的作用.它介导了 神经源性炎症反应.鉴于CGRP等神经肤的这种特性，人们开始广 泛探讨神经肤与疾病关系的研究.近年来，根尖炎时根尖周组织中 CG 纤维的变化在国外已进行了研究，但国内尚未见 报道 本实验目的在于阐明CGRP与根尖周炎症的关系，以探讨 根尖周炎的神经病理学机制。 厂 实验材料 } 、1、实验动物:16只Wistar大鼠雄性(200士50g) 2、主要仪器:恒冷冰冻切片机 光学显微镜 Luzex-F显微 图象分析仪 3、主要试剂;CGRP抗体 4%多聚甲醛(含0.2%苦味酸) 脱钙液 实 验 方 法 我们将16只wistar系的雄性大鼠随机分成4组，大鼠经腹腔 用1%戊巴比妥钠麻醉后，将实验组大鼠双侧上领第一磨牙开髓， 对照组不予处理，然后分笼饲养，分别于第8天、第15天、第35 天处死4只实验组大鼠和对照组大鼠。处死前用同样方法麻醉并 暴露心脏，用4%多聚甲醛(含0.2%苦味酸)心脏灌流，取双侧 上领第一磨牙根尖周组织，脱钙，修剪组织块，然后置05%蔗糖 磷酸盐缓冲液中脱晶，4℃过夜，待组织块沉底，经OCT包埋，用 恒冷冰冻切片机制作片厚17Rm纵向连续冰冻切片6张，其中2 张用于HE染色，4张用于免疫组化染色.使用光镜观察，然后用 Luzex一F显微图象分析仪测根尖周膜区CGRP阳性纤维密度，结 果进行统计学分析。 实 验 结 果 1、通过光镜观察:实验组根尖周组织均发生不同程度的组 织病理学改变.开髓8天、巧天组均有大量中性白细胞侵润、聚 集.开髓35天组，根尖周有脓肿形成，且有少量淋巴细胞侵润。 2、免疫组织化学染色后的切片经光镜观察可见:对照组根尖 周组织仅有少量CGRP阳性纤维分布;而实验组有丰富的CGRP 阳性纤维分布于炎症组织周围，纤维多为中等粗细，其走向迁曲， 方向不规则，多数纤维由棕黑色膨体呈串珠状构成，少数细纤维呈 均质的腊肠状.主要沿血管尤其是沿动脉血管周围呈环状或放射 状分布;部分以网状、丛状或游离神末梢分布于结缔组织中，常见 到由几条纤维组成的纤维束。开髓35天组的阳性纤维分布偏于 牙周膜的牙槽骨侧。 3、图象分析检测各组根尖周组织根尖周膜CGRP阳性纤维 面积百分比，经统计学分析结果为:开髓后8天、15天、35天组的 CGRP阳性纤维面积百分比明显高于对照组，以15天组的CGRP 阳性纤维面积百分比最高。 .2 · 讨 论 我们的实验表明:大鼠牙髓暴露8天，牙髓尚存活时，根尖周 间隙增宽，且CGRP免疫阳性纤维增多;大鼠牙髓暴露35天组，牙 髓完全坏死，根尖周形成局限性脓肿，此时，根尖周CGRP疫阳性 纤维增多，且围绕在脓肿周围，这个结果与国外文献报道基本一 致.这个结果表明了神经肤和感觉神经枝参与了炎症的发生与发 展，当然不能排除细菌学因素的影响.根尖周损伤神经机制学的参 与已被证实:神经肤加速血液流动，促进炎症反应、免疫细胞反应 及其它细胞的功能以及起着决定作用的防御及修复作用。 在我们的研究中，又增加了牙髓暴露15天组，而且CGRP阳 性纤维面积比牙髓暴露35天组的高，分析其原因可能是大鼠的自 身修复能力极强，牙髓