微直流电刺激对骨细胞生物学性能影响的体外实验研究.pdfVIP

微直流电刺激对成骨细胞生物学性能影响的体外实验研究 摘要 目的：通过对体外培养的成骨细胞施加不同强度的直流电刺激， 探讨微量直流电对成骨细胞增殖和功能的影响，为口腔修复临床应用 直流电促进牙槽骨生长提供体外细胞学依据。方法：自行设计研制 体外成骨细胞直流电刺激装置：将电源、滑动变阻器、开关、六孔培 养板固定在一块300mmx200mm的有机玻璃板上，并把电路串联起来， 在六孔培养板每孔所对应的板盖上打两个小孔，将镍钛弓丝一端与电 路连接，另一端穿过培养板盖浸入培养液内，将电路接通，于通电后 大鼠颅项骨的成骨细胞，传代培养至第三代进行碱性磷酸酶(alkaline 或第五代备用。实验第一部分，将细胞按1．0x105个／孔的浓度接种于 六孔培养板中，每板接种四孔，每孔2ml。实验分为三组，微电流对 三组细胞刺激的强度分别为O“A、201上A和100肛A，每天刺激三次， 于微电流刺激的第1天，第3天，第5天，第7天时分别收集三组细 胞，用MTT法测定三组成骨细胞的数量，之后重复该实验两次，用 Spssl6．0软件将所得数据进行统计学分析并绘制细胞增殖曲线；实验 第二部分，细胞分组及接种的方法同第一部分，之后于微直流电刺激 的第l天，第3天，第5天，第7天时收集三个实验组的成骨细胞测 定其ALP活性，重复该实验两次，将实验所得数据用Spssl6．0软件进 行统计学分析并绘制成骨细胞ALP活性直方图。结果：本实验自行研 制的成骨细胞直流电刺激装置通电过程中电流稳定，绝对误差在31．tA 内；经强度为20p．A和1001aA的直流电刺激后的细胞其增殖和对照组 无统计学差异，三组细胞均在第3--5天时增殖速度最快，第5--,7天 时增殖速度减慢；经强度为209A和1009A的直流电刺激后的成骨细 胞和对照组成骨细胞的ALP活性均有统计学差异；强度为209A的直 流电刺激组与强度为1009A的直流电刺激组比较，成骨细胞ALP活 性也有统计学差异(PO．01)，且直流电强度为209A的刺激组成骨细胞 的增殖无促进作用，但可以增加成骨细胞的ALP活性，且经209A的 直流电刺激的成骨细胞ALP活性明显优于经100“A直流电刺激的成 骨细胞，证明微量直流电可以促进成骨细胞的活性，特别是直流电强 度为209A时对成骨细胞活性的促进作用更为显著，这为微量直流电 用于口腔修复临床促进牙槽骨的增长提供了体外细胞学依据。 关键词：成骨细胞直流电碱性磷酸酶 2 MicroDCon in vitro the stimulationofdifferentintensitiesofdirectcurrentfor objective：By osteoblastsculturedin effectofmicrodirectcurrenton vitro，the andfunctionofosteoblastshasbeenstudied．It the proliferation by provides theoreticalbasisof for ofdirectcurrentto cytologyapplication promote alveolarbone for this we growthprosthodontics．Methods：In paperdesigne the and