端粒酶逆转录酶凋亡相关基因bcl-2在成釉细胞瘤中的表达及意义.pdfVIP

中文摘要 前 言 ／ f随着分子生物学技术的进展，端粒(telomere)和端粒酶(te。 lome／ase)成为当今国际生物医学界研究的热点之一，端粒酶是细 胞分裂的基础、增殖的保证，与细胞衰老、凋亡、永生化及肿瘤发生 发展密切相关。端粒酶是由端粒酶RNA和蛋白质组成的核糖核 蛋白DNA聚合酶，它具有逆转录酶的活性，以自身RNA为模板合 成端粒序列，补偿端粒的丢失，使细胞永生化。目前研究证明人端 telom— 粒酶包括三个组成部分，即人端粒酶RNA组分hTR(human RNA telomerase erELse component)，人端粒酶相关蛋白hTPl(human associated telomer- 1)和人端粒酶逆转录酶hTERT(human protein a$ereverse 粒酶的活性并不完全一致。hTERT是端粒酶的催化亚单位，在端 粒酶的激活中起关键作用，与端粒酶的活性密切相关。bcl一2基 因是凋亡抑制基因，端粒酶与bcl一2的关系尚有争议，但大多数 学者认为bcl一2调节端粒酶活性，bcl一2表达越强，端粒酶活性 越强。成釉细胞瘤(Ameloblastoma，AB)中二者关系未见报道。 AB是最常见的牙源性肿瘤，国内发病率为牙源性肿瘤的59． 3％，WH01992年牙源性肿瘤重新分类中，把AB定为良性肿瘤， 但由于其局部呈侵袭性生长，高复发，可恶变，可转移，有学者称之 为交界性肿瘤。AB发病和复发的原因均不能被完全解释，且临 床上常需手术治疗，切除颌骨破坏颜面外形，给患者带来极大痛 苦，引起口腔外科及病理学界的广泛关注。同样牙源性角化囊肿 (Odontogenic keratocyst，OKC)也为颌骨内常见最具侵袭性的囊 肿，其生物学行为同样不甚清楚；本实验采用原位杂交的方法，检 测AB和OKC hTERT和bcl一2的表达并进行比较和相关性分析， 探讨端粒酶的调控机制，研究AB的细胞分化与其临床生物学行 为的关系，为肿瘤的诊断、治疗和预后提供有力的理论依据。 材料与方法 原位杂交所用标本取自中国医科大学附属第一医院病理科 1996—2001年存档蜡块，共收集成釉细胞瘤54例(原发3l例，复 发19例，恶变4例)，OKCl6例，正常口腔粘膜(牙龈、颊)7例。 免疫组化所用标本取自中国医科大学附属口腔医院和附属第一医 例，恶变7例)，OKC35例，口腔正常粘膜(颊，牙龈)9例。原位杂 交法由北京大学医学部病理系提供。免疫组化法采用链霉素抗生 物素蛋白一过氧化物酶法(s—P法)。结果判定：(1)原位杂交： hTERT或bcl一2的胞浆中出现紫蓝色颗粒为阳性着色。5％计 +)。(2)免疫组化：A(按切片中细胞显色有无及深浅评分)：O分 为细胞无色；1分为浅黄色；2分为棕黄色；3分为棕褐色。B(按切 片中显色瘤细胞占切片中瘤细胞的比例评分)：1分为25％以下；2 分为25％一75％；3分为75％以上。每例积分=A×B，按积分高 低分为：阴性(一)，积分0分；弱阳性(+)，积分1—4分，强阳性 (++)，积分4分。统计方法采用SPSSl0．0统计软件，进行x2 检验和Kendall秩相关分析，P0．05具有统计学意义。 结 果 hTERT mRNA阳性表达部位在胞浆，7例正常口腔粘膜中，只 有1例上皮基底层为弱阳性。16例OKC阳性率为87．5％，表达 的范围由基底层向副基底层细胞扩展，阳性以弱至中度阳性为主。 54例AB中，阳性率为94．4％，阳性表达主要以中、高度为主，阳 性部位主要位：rYl-周柱状或立方状细胞及散在或密集增生的多边 ·2· 形、梭形细胞中。AB、OKC与正常上皮的表达分组有显著差异(P 0．001)