颌下腺、腮腺、腺所含表皮生长因子、神经生长因子的比较研究.pdfVIP

中 文摘要 前 言 生长因子发现已五十余年了，它与多种病理生理状态如生长， 分化免疫，肿瘤，造血，刨伤修复等有关，备受国内外各个医学领域 的重视。研究报道很多。作为外分泌腺的颌下腺、腮腺、泪腺等所 含生长因子的种类，生物活性及功能状态等亦引起广大学者的重 视。尤其所含与生长、分化、创伤修复有关的生长因子如表皮生长 factor 因子(epidermal EGF)、神经生长因子(nerve growth factor growthNGF)等，已陆续被提纯并予以组织学定位。这些生 长因子分泌入血或随唾液进入消化道，对机体的功能起着重要的 作用。 EGF是60年代从小鼠颌下腺提纯的～种多肽，分子量为 6045Da。是一种较早被命名的生长因子。通过自分泌或旁分泌等 途径发挥其生物学功能。EGF不仅对上皮细胞而且对多种细胞均 有促增殖作用。是与细胞生长分化有关的重要生长因子，调节细胞 复制，在伤口愈合，粘膜保护中起重要作用。Heitz等报道了人颌 下腺腺泡细胞内分泌EGF。90年代后国外学者相继报道证实了人 颌下腺、腮腺、泪腺含有EGF等生长因子。Scultz等报道泪腺合成 并且分泌EGF入泪液，促进损伤角膜上皮细胞和基质细胞的愈 合。NGF是神经系统最重要的生物活性分子之一，也是最早发现 和最典型的神经营养因子，也是交感神经元和感觉神经元分化、发 育、维持正常功能必不可少的营养因子。NGF是促进神经系统损 伤修复的重要因素之一，主要作用表现在保护效应神经元和促进 再生纤维生长两方面。 半个世纪来，被国内外学者公认为治疗困难的实质性结角膜 干燥症，即缺泪性干眼，属常见病，在我国发病率2．7％左右。其中 重症完全性干眼致盲率极高，严重影响患者生存质量。五十年代 ·】· Filatov采用腮腺管移植治疗干眼病，并研究证实涎液与泪液相 似，无副面作用。但由于腮腺管移植后出现“咀嚼流泪”的弊病，七 十年代后国内外报道已淘汰此种方法。此后，这种完全性重症干眼 病一直被认为是不治之症。90年代初Dr．Kumar及我院颌面整形 外科及眼科在国内外率先开展颌下腺游离移植再造泪腺治疗干眼 病，取得成功。发现颌下腺液对损伤角膜恢复起重要作用。实验研 究表明颌下腺液不但含有与腮腺液相同的浆液，而且含有更接近 泪液脂膜所需要的粘液成分，因此颌下腺优于腮腺取代泪腺。分子 水平研究表明颌下腺分泌EGF等生长因子。EGF又是泪液中所 含有的固定成分。重症干眼病患者角结膜严重受损，甚至有些已失 明。而颌下腺游离移植治疗干眼病后患者的损伤角膜逐渐得以恢 复，尤其令人兴奋的看到一些视力严重损害角膜严重混浊，甚至云 翳、斑翳形成者亦能在一段时间内恢复。角膜透明从而视力不断恢 复。为了从分子水平探讨颌下腺游离移植后颌下腺液中的成分对 损伤角膜恢复的作用，本实验对颌下腺、腮腺、泪腺组织所含 EGF、NGF等生长因子状况进行比较研究，旨在探讨颌下腺、腮腺 及泪腺所含EGF等生长因子的相对含量，为颌下腺移植治疗重症 干眼病提供分子水平的理论依据。 实验方法 成年人正常颌下腺10例，成年人正常腮腺9例，成年人正常 泪腺4例。所有标本取下后立即用PBS冲洗，并去除坏死组织，然 后置于一70℃冰箱中保存。全部实验过程均在。一4。c下进行。取0． 5 A(20mM g标本，加5倍的湿重标本缓冲液Buffer Tris／HCl Surcose PH7．50．25mM 10mM EGTA，2mM EDTA)之中，用 4C，33000转／分条件下离心(高速恒温离心机)1小时，取其上清 即所需蛋白。上述各样品用Folin法进行蛋白定量，各样品4℃贮 ·2· 存备用。