选修专题二植物细胞工程(复习)要点.pptVIP

动物细胞培养的条件: 1）无菌无毒 的环境： 适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度为: 36.5±0.5℃。 适宜的PH：7.2-7.4 液体合成培养基：（糖、氨基酸）、促生长因子、 （水、无机盐、微量元素）等； 通常还需加入血浆、血清等天然成分。 4）气体环境： 2）营养： 3）温度和pH： “95％空气+5％CO2”的混合气体培养箱。 氧气是细胞代谢必须的；CO2维持培养液的PH。 ①对培养液和所有培养用具无菌处理； ②培养液中添加抗生素防止培养过程中污染； ③定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。 使用时需要注意的问题？ 为何动物细胞培养必须加入血清？ 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 胰蛋白酶 加培养液 过程 细胞产生接触抑制，停止增殖，出现第一次危机 分瓶培养 细胞增殖缓慢， 甚至停止，出现第二次危机 遗传物质突变 贴壁生长 剪碎 胰蛋白酶 作用？用量？ 处理时间？ 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 培养正常或各种病变细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。 动物细胞培养的应用： 专题2 细胞工程 阳朔中学 高三生物备课组 考 纲 要 求 植物组织培养 B 动物的细胞培养与体细胞克隆 A 细胞融合与单克隆抗体 A 所依据的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 知识框架 一、植物组织培养的基本原理 植物细胞的全能性 原因： 表现的条件： 在植物体中未表现的原因： 每个细胞都含有本物种的全部遗传信息，都具有发育成一个完整个体的潜能。 离体 无菌、无毒的环境 适宜的培养基(营养物质和植物激素) 适宜的环境条件(温度等) 在个体发育过程中，基因在特定的时空条件下选择性表达的结果。 操作水平： 细胞水平、细胞器水平 二、植物组织培养 自主讨论2： 植物组织培养的材料： 幼嫩的细胞、组织、器官（植物的茎尖、根尖、叶、花药） 细胞全能性大小的比较：受精卵生殖细胞体细胞 植物细胞动物细胞 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分 组织或器官（常取幼嫩的组织或器官）　　 切取 接种 讨论三：用流程简图的形式表示植物组织培养的 一般过程　　 讨论4:脱分化：已分化的细胞，经诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成分生状态细胞的过程。 愈伤组织： 排列疏松而无规则，高度液泡化 且无定形状态的薄壁细胞 思考： 1、脱分化前后，细胞的形态是否改变， 细胞内遗传物质组成是否改变？ 2、脱分化过程，所需要的条件有哪些？ 3、脱分化培养基中对生长素和细胞分裂素的比例要求是怎样的？ 形态改变，遗传物质不变。 离体、无菌、适宜的培养基和温度、避光 生长素和细胞分裂素的比例适中，能强烈刺激愈伤组织形成。 讨论5：再分化 愈伤组织在分化培养基上，被重新诱导分化出胚状体或丛芽的过程。 思考： 再分化过程中，所需要的条件有哪些？ 适宜的温度、适宜的培养基、适宜的光照、无菌 生长发育 再生根 生长发育 试管苗的形成 移 栽 经过炼苗的小苗，可以和一般植物一样进行大规模栽培 1.（2011年江苏卷.16）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是 ( ) A．愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B．二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得 D 2.（2011上海生命科学卷．22）下列关于植物组织培养的表述，错误的是（ ） A．外植体可以来自于植物的任何细胞 B．培养应在无菌条件下进行 C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株 D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同 A (1) (1) (2) (3) (4) (5) 三、植物体细胞杂交过程 (1)去壁，分离原生质体 (2)诱导原生质体融合(原理：细胞膜的流动性) (3)再生细胞壁（杂种细胞形成的标志） (4)（5）植物组织培养（脱分化、再分化） 去壁的常用方法： 酶解法（纤维素酶、果胶酶等） 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG） 原生质体融合方法： 杂种细胞形成的标志： 新细胞壁的形成 植物体细胞杂交完成的标志： 杂种植株