苦丁茶冬青化学成分及抗血小板聚集活性的分析.pdf

Y2825518 摘要 苦丁茶冬青是冬青科冬青属植物，以干燥叶入药，性平味苦，具有清热解暑的功 效。苦丁茶冬青主要含有三萜皂苷类、多酚类、多糖类和挥发油类等化学成分，具有 降血压、降血脂和抗菌消炎等药理作用，临床上用于治疗高血压、高血脂和高血糖等 疾病。本课题对苦丁茶冬青化学成分展开了较为系统的研究，选择了具有代表性的化 合物进行含量测定，并对分离得到的三萜皂苷类化合物进行了体外ADP诱导的抗血 小板聚集活性筛选，以期为后续深入研究苦丁茶冬青的药理作用和质量控制方法提供 科学参考。 本实验以苦丁茶冬青叶的甲醇提取物为材料，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙 酯和正丁醇萃取得到各部位的浸膏，再综合运用各种柱色谱法和重结晶法对各部位浸 膏进行化学成分的分离纯化。共分离得到35个化合物，通过理化性质、瓜、NMR和 acid (1—2)】一口-L—arabinopyranosylurs一12，19(29)--dien．-28·．oic 、 ester(1) (1_2)1良D—glucopyranosyl acid 28．(9-tZ．L．．rhamnopyranosyl(1}2)-f1．D．glucopyranosyl H(8)、kudinoside D(4)、kudinosideG(5)、latifolosideC(6)、latifolosideG(7)、latifoloside Q(10)、ilekudinosideT(11)、kudinosideE(12)、kudinosideH(13)、 A(9)、latifoloside ilekudinoside R(14)、齐墩果酸(15)、ilekudinoside 合物17、19、33和35首次从苦丁茶冬青中分离得到。 为了加强苦丁茶冬青的质量控制，本实验在前期化学成分研究的基础上，采用高 效液相色谱法测定了苦丁冬青多个化合物的含量。首先建立了同时测定苦丁茶冬青中 T 7个三萜皂苷类化合物f4～9、12)含量的方法，色谱条件：YMCC18色谱柱(YMC—pack n／11．5 mL／min，检 ODS．A，250x4．6um)，乙腈．水为流动相进行梯度洗脱，流速为1．0 oC；结果表明7个三萜皂苷化合物均有良好的分离度， 测波长为210nin，柱温为30 在0．22~4．95(r0．9999)、0．24-5．40(r0．9995)、0．20~4．50(r0．9996)、1．02N22．95(r O．999 9)、0．96～21．60(r0．9999)、1．18-26．55(rO．9999)和O．30-6．75(r0．9999)I．tg／ml 范围内线性关系良好，平均加样回收率在99．25％～100．8％，RSD2％。随后又建立了 Cls色谱柱(kromasil，250×4．6 nnl．5“m)，乙腈一水(含0．02％一氟乙酸)为流动相进行 梯度洗脱，流速为1．0 mL／min，检测波长为260nm，柱温为30oC；结果表明5个酸 类化合物均的分离度良好，在0．003～0．043(rO．999 0．052～0．650(rO．999 9)、O．280-3．500(r0．9999)、0．400～5．000(r0．9999)“g／mL范 围内有良好的线性关系；平均加样回收率在96．37％～103．3％，RSD3％。共测定了苦 丁茶冬青中12个化合物，所采用的测定方法简单有效，具有良好的重复性和稳定性， 能为