DEHP对大鼠酮合成及StAR、P450scc基因表达影响的研究.pdfVIP

A Dissertation Submitted in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master in Medicine The Research on the Effect of DEHP on the Progesterone Synthesis and the StAR, P450scc mRNA Expression of Ovaries in Rats Master Candidate： Liu Shumin Major ： Occupational and Environmental Health Supervisor ： Prof. Chang Wei Wuhan University of Science and Technology Wuhan, Hubei 430081, P.R.China May 23th, 2014 万方数据 万方数据 摘 要 目的 探讨邻苯二甲酸二(2- 乙基己基)酯(Di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP) 的暴露对 青春期雌性大鼠孕酮分泌水平的影响，以及对孕酮合成的限速步骤——类固醇急 性调节蛋白（StAR ）、胆固醇侧链裂解酶（P450scc ）的基因表达的影响。通过对 青春期雌性大鼠短期染毒，对参与激素合成有关基因的表达水平进行分析，初步 探讨DEHP 对雌性生殖毒性的可能机制。预期结果将为DEHP 的生殖内分泌干扰 研究提供基础资料，为阐明环境内分泌干扰物的生殖内分泌干扰机制及其危害防 治研究提供重要的科学依据。 方法 1、取青春期的雌性SD 大鼠32 只，随机分到对照组和DEHP （低、中、高） 三个实验组中，四个剂量组每组8 只。按10 mg/kg/d、100 mg/kg/d 和1 000 mg/kg/d DEHP 分别对各实验组大鼠进行灌胃，并用溶剂(玉米油)作为对照为对照组进行灌 胃。 2 、连续灌胃 10 天，采集大鼠的血液，分离血清，测定孕酮含量；取大鼠卵 巢组织提取总 mRNA ，逆转录 PCR （Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction ，RT-PCR ）分析测定StAR 和P450scc 基因表达水平。 3、应用Excel 录入数据，统计学分析使用 SPSS19.0 进行，以α=0.05 的检验 标准，判断差异是否具有统计学意义。 结果 1、模型效果 邻苯二甲酸单乙基己基酯(Mono-2-ethylhexyl phthalate，MEHP)是DEHP 的初 级代谢产物，大鼠血清中MEHP 含量随着染毒剂量增加呈上升趋势，说明动物染 毒成功。 I 万方数据 2 、大鼠体重和卵巢重量变化 随着染毒时间延长，各组大鼠体重均增加；随着染毒剂量的增高，体重增加 量有减小趋势。随着染毒剂量的增加双侧卵巢重量逐渐减小，高剂量组 （1000mg/kg）与其他三组比较，卵巢重量减少有统计学意义（P0.05 ）。 3、血清中孕酮的检测结果 低剂量组（10mg/kg）比对照组（0mg/kg ）和中剂量组（100mg/kg）的血