不同浓度氟化钠小胶质细胞的活化及氧化损伤的研究.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………．1 英文论著摘要……………………………………………………………………．6 二、英文缩略语………………………………………………………………………11 三、论文 日Ⅱ舌………………………………………………………………………………12‘前言………………………………………………………………………………12 材料与方法………………………………………………………………………14 实验结果…………………………………………………………………………18 讨论………………………………．．……………………………………………．26 结论………………………………………………………………………………28 四本研究创新性的自我评价………………………………………………………29 五、参考文献…………………………………………………………………………30 六、附录 综j丕………………………………………………………………………………34 在学期间科研成绩………………………………………………………………41 致{射………………………………………………………………………………42 个人简介…………………………………………………………………………43 ·中文论著摘要· 不同浓度氟化钠致小胶质细胞的 活化及氧化损伤的研究 --■_--_●- 刖 声 氟是人体必需的微量元素，位于元素周期表中的第二排第七位，是目前发现 的最活泼的非金属元素，但摄入过量会引起氟中毒。我国是地方性氟中毒的高分 布国家，除了有饮水型地方性氟中毒外，还有世界上其他国家所没有的燃煤型和 饮茶型地方性氟中毒。我国现有病区县1380个，受威胁人口达1．25亿人。除上海 外，其余各省、市、自治区均有不同程度的氟中毒流行。氟中毒的主要表现为氟 斑牙和氟骨症，还可以对心血管、肾脏、神经系统等多个系统和器官产生影响。 在正常情况下一定量的氟可通过与白蛋白结合或以氟离子的形式穿过血脑屏障进 入脑组织，并可在脑内蓄积，进而影响脑细胞的正常生理功能。包括损伤神经受 体、使神经细胞变形、神经纤维髓鞘脱落、神经递质和酶发生变化，从而产生一 系列神经系统的损伤表现，影响记忆和思维能力。近年来，一些现场调查研究发 现，氟中毒病区儿童智力水平明显下降，氟对中枢神经系统的损伤受到关注，但 其作用机制尚不清楚。 在神经元的生理活动中起着支持、营养、保护及修复等重要功能。MG主要为分枝 状和阿米巴状，不同形态代表不同的功能状态。正常生理状况下，MG处于非活化 状态，当中枢神经系统损伤、炎症、或受外来物刺激时，可以活化，发挥免疫保 护作用。MG的活化有直接和间接两种作用方式。直接作用是受各种刺激后，MG 可表达各种抗原，行使抗原提呈细胞的功能；间接作用是MG可分泌神经营养因子、 炎性或抑炎性细胞因子、趋化因子等，刺激中枢神经系统(CNS)其它细胞进行细 胞间免疫调节。但MG的过度激活可产生大量细胞因子及活性氧产物，其异常激活 及其所诱导的炎症反应是多种环境因素所致中枢神经系统损伤的重要因素。因此， 本研究以MG为切入点，了解氟是否可诱导MG活化及其所致氧化损伤情况，探讨 氟致中枢神经系统损伤的机制。 材料和方法 一、实验方法 (一)细胞培养 小胶质细胞系(BV．2)购自中国协和医科大学基础医学细胞中心。细胞常 规培养于DMEM高糖培养基(含10％胎牛血清，lxl05U／L青、链霉素)，5％C02、 37℃条件下培养。待细胞达到70％--80％融合时，以1：3进行传代。 (二)细胞增殖活力检测 采用MTT比色法。实验分为对照组和9个染氟组，每组设置三个平行样。用 酶标仪测定各孔的光密度(OD)值，细胞活力用还原率表示。还原率越高，表示 细胞增殖活力越强。 ctM(OX．42)的免疫细胞化学检测 (三)Integrin 采用免疫细胞化学方法，观察BV-2细胞活化后特异性标志物OX．42的表达 情况。细胞呈棕色者为阳性细