乙二醛对大鼠淋细胞活力及DNA损伤影响的实验研究.pdfVIP

中文摘要 目 的 乙二醛是一种a一酮醛，为合成树脂的中间产物，广泛应用于造纸、纺 织、制药、染料生产等工业，可以用来合成乙二醛酸，在水和大气芳香烃的臭 氧化产物中，加热后的糖和咖啡及烟草中也发现其存在。它的毒性较低，主 要表现为对眼及呼吸道粘膜的刺激作用。曾有报道，乙二醛具有细胞毒性， 能导致脂质过氧化发生，可诱发活性氧自由基的产生。近来的研究表明，它 还具有致突变性和致癌性。本研究采用mamarBlue。1”摄入法检测不同浓度 乙二醛对大鼠淋巴细胞活性的影响，用单细胞凝胶电泳技术 SCGE，又称彗 星试验 检测经体内及体外染毒7--醛对大鼠淋巴细胞DNA的损伤作用， 研究乙二醛的遗传毒性，为探讨乙二醛的毒作用机制提供实验依据。 方 法 1．淋巴细胞活性测定 分离淋巴细胞，加入RPMll640培养液，调整细胞密度为1x105个／ml， 结束培养前4小时加入AlamarBlue，在培养箱中继续孵育至培养结束。用 酶标仪在540rim和620rim波长下分别测定各孔吸光度。 2．DNA损伤测定 2．1 大鼠腹腔注射染毒乙二醛 组5只。实验组分为三组，腹腔注射乙二醛水溶液，剂量分别为12．5、25和 50mg／kg体重，对照组注射等量生理盐水。染毒后16小时采血，分离淋巴 细胞。用单细胞凝胶电泳试验检测DNA损伤。 2．2乙二醛在体外染毒大鼠淋巴细胞 分离淋巴细胞，调整细胞密度为3×106个／m1，分别加入终浓度为0、 ．1． 泳试验检测DNA损伤。 3．统计分析 实验数据用SPSSl0．0软件进行x2检验和单因素方差分析。 结 果 1．乙二醛对淋巴细胞活性的影响 力有抑制作用，与对照组相比有显著差异。 2．乙二醛对淋巴细胞DNA的损伤作用 2．1 sCGE图像 镜下大鼠外周血淋巴细胞DNA被染成桔红色，正常的呈圆形，质地均 匀致密。中、高剂量的乙二醛染毒后，外周血淋巴细胞受损，受损细胞的 DNA断片在碱性条件下向阳极迁移，形成拖尾 即彗星图像 。 2．2 乙二醛对在体淋巴细胞DNA的损伤作用 腹腔注射中、高剂量的乙二醛均可致大鼠淋巴细胞DNA损伤，彗星细 胞发生率与彗尾长明显高于对照组；各剂量组间比较，差异有显著性。 2．3 乙二醛对离体淋巴细胞DNA的损伤作用 中、高剂量的乙二醛可致大鼠淋巴细胞DNA损伤，其彗星细胞发生率 与彗尾长均高于对照组，且各剂量组闽差异有显著性，呈现剂量效应关系。 结 论 1．高浓度乙二醛可抑制大鼠外周血淋巴细胞的活力，具有细胞毒性。 2．用单细胞凝胶电泳技术检测不同剂量的乙二醛经体内及体外染毒对 大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用，结果表明，中、高剂量L-醛可致大 鼠淋巴细胞DNA损伤，且随着染毒剂量增加，DNA损伤加重。 关键词：乙二醛；细胞活力；DNA损伤；单细胞凝胶电泳 ·2· Effect andDNA of on The Study Activity Experimental Rat Induced in byGlyoxal DamageLymphoeytes Abstract Objective is isan can acid．It o【一keto synthesize Glyoxal aldehyde，which slyo nc in usedindustrysuch踮paper extensively isanintermediateofthe resin．It SOOB．It manufacture，and productsynthetic foundin of aromatic is ozonated water，ozonatedproductsatmospheric drinking aS ithas andcoffeeaswell the hydrocarbons，heatedslucose cigarette．Inpast been thatthe of islowand associatedwithsimu‘ toxicity mainly thought glyoxal alsobeen in andthemucosaofthe tract．Ithas lationthe eyes respiratory rcpor- ithasbeen that ted has recent found cytotoxicity．Inyears glyoxal that出oxal has has and aclose addition，it relationship carcinogenicity．In mutagenicity the of free with itcallinduceformationactive lip