反式脂肪酸对人静脉平滑肌细胞增殖及功能的影响.pdf

摘要 摘要 动脉粥样硬化(AS)是一种复杂的心血管内膜病变，包括单核细胞粘附内 皮细胞并穿过内皮间隙进入内膜下层、动脉中膜的平滑肌细胞(SMC)迁入内 膜进而增生形成纤维斑块等病理过程。反式脂肪酸(TFA)作为一种独立的促心 血管疾病因子越来越受到重视。近年来许多研究表明TFA与动脉粥样硬化的发 生发展息息相关，但大多聚焦于TFA对血管内皮细胞的影响，TFA对血管平滑 肌细胞的作用未见相关报道，并且国内外研究主要用反式脂肪酸的混合物作为 研究主体，很少分别研究两种不同饱和度反式脂肪酸对心血管疾病的影响。近 年有学者发现广泛存在于中国日常膳食中的反油酸(9t18：1)和反亚油酸 流行病学证据已经证实这两种TFA的致AS作用具有显著差异。因此，为了探 究9t18：1和9t12t18：2对心血管平滑肌细胞的影响及其机制，本研究采用流式细 8：1和 9t12t18：2对平滑肌细胞活力和功能的影响，为进一步探明TFA与AS的关系提 供科学数据。 力的影响；通过流式细胞术检测TFA对细胞周期的影响；进一步通过荧光定量 关基因和蛋白表达量的影响，探讨TFA促平滑肌细胞增殖进而诱导AS发生的 机制；再运用高效气相色谱法分析TFA对平滑肌细胞脂肪酸组成的影响；最后 通过内皮和平滑肌细胞的联合培养，观察TFA对联合培养条件下内皮细胞的功 能影响。主要取得如下研究成果： 9t18：1 1．低浓度的9t18：1和9t12t18：2均能促进平滑肌细胞增殖，且501aM 和20I_tM9t12t18：2促增殖作用最强(48h细胞存活率与对照组相比分别达到 对平滑肌细胞具有毒性，促进细胞凋亡。 2．TFA降低平滑肌细胞内多不饱和脂肪酸(PUFA)含量，特别是n．3PUFA， 养液中浓度的增加，细胞内TFA含量明显增加。 9t18：1和5．20 3．两种TFA均能引起平滑肌细胞周期改变。20，50I_tmol／L 摘要 9t12t18：2均能促进平滑肌细胞由G0／G1期进入S期，使处于增殖期的细 gmol／L 胞数量百分比明显增加；当9t18：1浓度在50gmol／L时S期细胞数量由对照组的 3．4±0．2％增加到27．7+0．7％，而20 gmol／L的9t12t18：2使S期的细胞数升高到 25．8±2．8％。平滑肌细胞由正常的收缩型细胞形态进入合成分化型，促进AS的 病理发展。 mRNA和蛋白质的表达量，但抑制p21基因的表达。 eNOS等炎症因子；但当SMC与EC只有旁分泌信号交流时，TFA的这种促炎 症作用不明显。 。 关键词：9t18：1；9t12t18：2；人脐静脉平滑肌细胞；增殖 III ABSTRACT ABSTRACT akindof vascular Atherosclerosis(AS)was endothelialdisease． complicated adheretothe endothelial enterinto of as Monocyte intima cells(ECs)andsublayer wellas