几种药物小分子生物大分子相互作用的研究.pdf

摘要 摘要 物体内发挥着各种与生命活动有关的重要作用。DNA是遗传信息的载体，在生 物进化过程中起着决定性的作用，而蛋白质又是这些遗传性状的直接表达者。 因此，对蛋白质与DNA的各种研究是当前生命科学、医药学、化学等领域的前 沿和热点。从分子水平上了解药物小分子与蛋白质及DNA等生物大分子的相互 作用，有助于人们更加清楚的了解各种药物在生物体内的药理作用，同时也能 为设计和筛选药用效果更加明显、毒副作用更小的新型药物提供科学的指导。 本文在前人的工作基础上，运用荧光光谱法、紫外一可见分光光度法研究了几种 药物小分子分别与人血清白蛋白、牛血清白蛋白及DNA的相互作用。论文一共 分为以下几个部分： 第一章药物小分子与生物大分子相互作用概述 主要介绍了药物小分子与生物大分子相互作用的研究现状，概述了人血清 了当今研究药物小分子与生物大分子相互作用的主要方法，着重叙述了荧光光 谱法及紫外-可见分光光度法在本论文研究领域的应用现状，为本论文的展开铺 垫了理论依据。 第二章荧光光谱法研究淫羊藿苷与人血清白蛋白的相互作用 猝灭作用，证明淫羊藿苷与HSA通具有很强的结合能力。通过考察不同温度下 灭常数相应降低，得出淫羊藿苷与HSA之间系形成了复合物的单一静态猝灭过 程，在29C F其结合常数为3．80x104 L．mol～。根据热力学常数△且△G及△s 的变化(AG=一26．46kJ—roofl0，△S=124．64 摘要 量转移效率(占=o．07898)，得出淫羊藿苷与HSA结合位置距色氨酸残基的距离 为4．18 sln．应用同步荧光光谱法及三维荧光法研究了淫羊藿苷对HSA结构的 影响，发现当△九=60nm时(仅显示色氨酸残基特征荧光)，HSA同步荧光强度 随淫羊藿苷的浓度增加而明显下降，最大荧光发射峰位置红移了5nnl，说明HSA 色氨酸残基附近的微环境疏水性降低、极性增强，HSA内部的疏水腔结构有所 瓦解，肽链的伸展程度有所增加，从而推断HSA的构象发生了一定程度的变化； 当△丸=15咖时(仅显示酪氨酸残基特征荧光)未见蜂位置的移动，推断酪氨酸 残基附近微环境没有发生或发生很小的变化。通过考察三维荧光光谱及三维等 高线的情况，进一步得出HSA的结构在淫羊藿苷存在下发生了明显的变化。 第三章葛根素与牛血清白蛋白的相互作用及共存金属离子的影响研究 葛根素(Pure，PUE)是豆科属植物葛根异黄酮的主要活性成分之一。 本章在生理条件下，研究了葛根素与BSA相互作用的荧光光谱及紫外吸收光谱。 属于形成了复合物的静态猝灭过程。根据FOrst盯非辐射能量转移理论。葛根素 发射图谱的重叠积分(．，=8．05x10“5gill3．L．tool‘)，计算出葛根素与BSA结合 位置距色氨酸残基的距离为3．53眦。考察当△丸；60nm及△九=15nnl时葛根素 对BSA同步荧光光谱的影响，发现在△九=60 nnl时，葛根素使得BSA荧光强 度明显下降，且最大峰位置红移约5I硼，提示色氨酸残基附近微环境极性增强， 最大峰位置没有发生移动，说明葛根素对酪氨酸残基附近微环境影响不大。此 样便延长了药物的释放时间，增长了药效时问；Ca2+的存在减小了葛根素与BSA 的结合常数，缩短了药物在血浆中的储留时间，增大了药物的最大作用强度。 最后用同步荧光光谱法在△丸=110nln下作出了葛根素的定量测量工作曲线，检 m 摘要 测限为0．0228岭·mL‘． 第四章荧光法研究恩诺沙星与牛血清白蛋白的结合作用 应用荧光光谱法、紫外．可见分光光度法研究了生理条件下恩诺沙星与BSA的相 互作用。实验表明。恩诺沙星能降低BSA的内源性荧光，通过Stem．Volmer方 10”L·tool～·s|1。 程，计算出恩诺沙星对BSA荧光的猝灭速率常数为‰=3．10x 远大于各类猝灭剂对生物大分子最大扩散碰撞猝灭常数，得出恩诺沙星对BSA 内源性荧光的猝灭机制属于形