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氡与亚砷酸钠对HBE 细胞联合毒性作用研究 中文摘要 中文摘要 目的 探讨氡与亚砷酸钠染毒永生化人上皮细胞（HBE cells ）联合作用类型及 联合染毒对HBE 细胞氧化损伤和DNA 损伤的影响。 方法 （1）以HBE 细胞为研究对象，将HBE 细胞单独暴露于20000Bq/m3 的 氡染毒不同时间（0～75 min ）、不同剂量（0～50000μmol/L ）的亚砷酸钠以及二者 的联合染毒，采用活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率。通过中效原理计算 不同时间氡暴露和不同剂量亚砷酸钠染毒联合作用的联合指数（combination index，CI ）。（2 ）以不同时间氡暴露（20000 Bq/m3 ，10、20 和40 min ）和不同浓 度亚砷酸钠（1.5、3.0 和6.0μmol/L ）处理HBE 细胞，测定氡、亚砷酸钠单独及联 合染毒后，HBE 细胞活性氧（reactive oxygen species ，ROS ）、丙二醛 （malondialdehyde，MDA ）含量和超氧化物歧化酶（superoxi dismutase，SOD）活 力的变化；通过彗星实验检测氡、亚砷酸钠单独及联合染毒后 HBE 细胞的 DNA 损伤情况；（3 ）通过Western blot 检测在氡、亚砷酸钠单独及联合染毒后24 小时， DNA 损伤蛋白γH2AX 和DNA 修复蛋白Rad51 。 结果 （1）氡与亚砷酸钠单独或联合染毒对HBE 细胞均有抑制作用；不同时 间氡暴露和不同剂量亚砷酸钠联合染毒的联合指数CI1，表明二者呈现协同作用。 （2 ）在单独染毒的条件下，与空白对照组相比，氡单独染毒组和亚砷酸钠单独染 毒组 ROS 和MDA 含量均随暴露时间延长和浓度增大显著升高，SOD 活力均显著 下降（P0.05 ）；且分别随着氡暴露时间的延长和亚砷酸钠染毒剂量的增加，HBE 细胞内MDA 和ROS 含量均呈现明显的上升趋势，而SOD 活力明显下降。当联合 染毒时，分别在氡暴露时间恒定以及亚砷酸钠剂量恒定的条件下，各联合染毒组 HBE 细胞 ROS 和 MDA 的含量均明显增加（P0.05 ）；SOD 活力均显著下降 （P0.05 ）。（3 ）彗星实验：与对照组相比，氡单独染毒组及亚砷酸钠单独染毒组， 各组HBE 细胞的尾部DNA 百分含量、尾距和Olive 尾距均显著增加（P0.05 ）； 当联合染毒时，在氡暴露时间恒定以及亚砷酸钠剂量恒定的条件下，联合染毒组 HBE 细胞尾部DNA 百分含量、尾距和Olive 尾距均显著增加，且均高于对照组、 氡单独染毒组及亚砷酸钠单独染毒组（P0.05 ）。（4 ）Western blot 实验：与对照组 I 中文摘要 氡与亚砷酸钠对HBE 细胞联合毒性作用研究 比较，各染毒组的DNA 损伤蛋白γH2AX 表达量明显增加，而DNA 修复蛋白Rad51 表达量下降；与氡单独染毒组和亚砷酸钠单独染毒组相比，联合染毒组γH2AX 表 达量明显增加，Rad51 表达量明显降低，且随着染亚砷酸钠剂量的增加，γH2AX 表达量呈现上升趋势，Rad51 表达量呈现下降趋势。 结论 1、氡与亚砷酸钠联合染毒HBE 细胞具有协同抑制细胞生长的作用。 2 、氡与亚砷酸钠联合染毒HBE 细胞，通过造成严重的氧化损伤和DNA 损伤， 抑制其生长。 关键词：氡；亚砷酸钠；氧化损伤；DNA 损伤与修复 作 者：刘星 指导教师：安艳 教授 童建 教授 II 氡与亚砷酸钠对HBE 细胞联合毒性作用研究