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- 2016-03-24 发布于贵州
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河北省肾综合征血热疫区病原型别研究
中文摘要
河北省肾综合征出血热疫区病原型别研究
摘 要
目的:采用流行病学、血清学和分子生物学相结合的方
法,对河北省HFRS病原进行分氆,以期阐明疫区病原的型
别特征及分布情况,为更为有效地诊疗和防控该病提供科学
依据。
方法:
区域分布特征及发病季节特征。
2疫源地调查,夹夜法捕鼠,无菌取鼠肺;
3用冷冻切片机切鼠肺,冷丙酮固定后,问接免疫荧光
法筛选汉坦病毒阳性鼠肺,总结分析疫源地特征;
4从阳性鼠肺中提取总RNA,逆转录套式PCR
(RT-nested
p(、R)扩增,进行基因分型;
5在各重点疫区采集病人或疑似病人早期血液标本,提
取总RNA,逆转录套式PCR(RT-nestedPCR)扩增,进行
基因分型;
6选择代表性疫区监测点采集病人恢复期血清,采用血
凝抑制试验(HI)进行血清分型
7选择代表性疫区HFRS病毒株,采用属、型和亚属特
异性McAb进行抗原反应谱分析。
结果:
l全省HFRS疫区广泛存在,11个地市均有发病,发病
高密度县(市、区)主要集中在中部、南部和东北部地区,体
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现出既高度散发又相对集中的特点。从疫情月分布构成情况
看,主要集中于3-6月份,占全年总发病数的65.73%,有明
显的春夏季发病高峰。
22004~2005两年鼠间疫情资料显示,全省各地宅区鼠
密度明显高于野外,宅区鼠种主要为褐家鼠并lld,家鼠,分别
占宅区总捕获鼠种的88.41%和10.85%:野外鼠种主要为褐
家鼠、黑线姬鼠和大仓鼠,分别占野外总捕获鼠种的50.61%、
13.72%和11.28%。河北省的优势鼠种为褐家鼠。从全省各地
鼠带毒率分布情况看,我省肾综合征出血热疫源地带毒鼠主
要以宅区褐家鼠为主,其次为宅区小家鼠,野外带毒鼠不是
主要传染源。
3对河北省汉坦病毒阳性鼠肺35份同时用SEO型和
HTN型分型引物进行RT-nestedPCR扩增,产物经1%的琼脂
糖凝胶电泳后显示32份阳性鼠肺所携带汉坦病毒均为SEO
型,未发现HTN型。
4从小家鼠、田鼠两个河北省的非优势鼠种中扩增出
SEO型特异性条带,证明它们携带SEO型汉坦病毒,再次
证明不同鼠种可携带同型汉坦病毒,存在“宿主溢出”现象。
5
分型引物分别进行扩增,12份经RT-nestedPCR内套引物扩
增后证实为SEO型,未发现HTN型。提示河北省人感染汉
坦病毒以SEO型为主。
688份患者恢复期血清标本经HI法检测均呈阳性。依
分型标准,II型血清76份,占总数的86.36%;I型1份,
占1.14%,来源于秦皇岛:未定型11份,占总数的12.5%。
在未定型中,以秦皇岛所占比例最高,邢台次之,石家庄最
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低。
7采用27株McAb对6株病毒株进行抗原反应谱分析
显示,毒株均与多数属特异性和II型特异性McAb反应。与
性,都属于II型病毒。各毒株问抗原性不尽相同,有的差异
较大。
结论:
区,但不排除I型病毒感染在局部地区的少量存在。
2褐家鼠是河北省的优势鼠种,并且是河北省HFRS的
主要传染源。
3河北省代表性疫区宿主动物所携带的汉坦病毒血清
型和基因型以II型为主,II型病毒是河北省HFRS病毒的优
势型别,是造成病人感染和疫情广泛存在的主要型别。
4河北省II型HFRS病毒抗原存在复杂性。
5河北省野外宿主动物可携带II型病毒。不同鼠种可携
带同型汉坦病毒,存在“宿主溢出”现象。
清学分型结果一致。套式RT-PCR对于HFRS病毒分型来讲,
是一种可行的方法。
关键词:肾综合征出血热;汉坦病毒;分型;RT-nested
PCR;McAb抗原性分析;血凝抑制试验
.. 茎墨塑墨 一一一
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HFRS in
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