谷氨酰胺诱导人个核细胞热休克蛋白70表达的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………2 英文缩写…………………………………………………………………4 研究论文谷氨酰胺诱导人单个核细胞热休克蛋白70表达的研究 前言………………………………………………………………………………………·55日U舌………………………………………………………………………………………‘ 材料与方法…………………………………………………………7 结果………………………………………………………………………………………·14 附图…………………………………………………………………15 附表………………………………………………………………………………………·16 讨论………………………………………………………………………………………·17 结j沧………………………………………………………………………………………·19 参考文献¨…………………………………………………………·19 综述 诱导热休克蛋白表达对氧化应激的保护作用研究综述…………22 致谢………………………………………………………………………………………………28 个人简历…………………………………………………………………29 中文摘要 谷氨酰胺诱导人单个核细胞热休克蛋白70表达的研究 摘 要 目的：探讨经内毒素 LPS 刺激不同时间及不同浓度谷氨酰胺 Gin 方法：取健康志愿者新鲜外周血滤过的血盘，用生理盐水按1：1稀释 得到的细胞置入含4ml培养液的细胞培养瓶中，每瓶数量约为lxl07个 ／ml。所有细胞均在37。C含5％C02的温箱中培养。实验共分为三个部分， LPS加入培养液中刺激PBMC不同时间 0、2、4、 第一部分将10mg／L 12、24h ，留取细胞和培养液上清，采用westem blot方法检测HSP70 的表达；第二部分将不同浓度Gln 0、I、4、8、10和15mmol／L ]Jfl入培 养液中，分别处理2h后，加入内毒素10 mg／ml刺激2h，留取细胞和培 养液上清，采用western mmol／L 激PBMC2h后，使用10 0．5h、lh、2h、3h Gin分别刺激PBMC 后，提取蛋白，留取细胞和培养液上清，用Westernblot检测HSP70表达 的变化。 达量最高 P 0．05 。使用Gin刺激PBMClh后，HSP70的表达最高 尸 0．05 ，而后表达减少。 结论：Gin可上调内毒素诱导的单个核细胞HSP70的表达。 关键词：谷氨酰胺；热休克蛋白70；内毒素；单个核细胞 英文摘要 The between of 70 heatshock in relationshipexpression protein blood mononuclearcelland peripheral stimulationtimeaswellas concentration glutamine ABSTRACT theinfluenceabout ofheatshock Objective：Toexplore expression bloodmononuclear protein70 HSP70 in peripheral and ofdifferenttime with lipopolysaccharide LPS stimulation pretreatment differentconcentrationof glutamine Gin ． Methods：Freshblood from volunteersfiltrationof peripheral healthy bloodfor dilutedwith was 1：1 salineandextractedoutofPBMC rent，blood Ficoll-sodiumdiatrizoate using density gradient cellsintothe 4mlof cellcultureflask Ficoll—Hypaque ．The containing culture numberisabout4m1．Allcellswere at37℃ medium，bottle cultured incubator．Theisdividedintothree 5％C02 containing experiment parts，the first ofthe10 LPSaddedtotheculturesolutionPBMCstimulated part mg／L atdifferent westernblotmeth