铅和乙醇对雄性鼠免疫系统联合作用的研究.pdfVIP

中文摘要 前 言 铅是人类广泛接触的有毒重金属之一，对机体的几乎所有组织器官都 可造成损害。乙醇是常用的有机溶剂及酒类饮料的主要成份，乙醇对机体 多个系统都有影响。铅与乙醇均是接触频率高，暴露人群广泛的化学物质。 在铅作业工人、尤其是青年工人中多有嗜酒行为，有人在对铅接触者的调查 中发现90％的男性工人有饮酒习惯。乙醇可促进骨骼中铅的释放，使中毒 症状明显加重。饮酒者发生铅中毒的比例较高。因此，研究铅和乙醇的联 合毒作用具有重要的理论和实际意义。 近年来，关于铅和乙醇对全身各系统的联合作用的研究逐渐深入，对于 不同的组织器官，铅和乙醇的联合作用类型不尽相同，有的表现为拮抗作 用，更多的表现为协同作用。虽然目前关于铅和乙醇联合毒作用的报道较 多，但对免疫系统影响的研究还很少，尤其是对整体动物的研究更为少见。 免疫系统是维护机体健康、正常执行生理生化功能的重要保证，也是化学毒 物经常攻击的靶组织。为了阐明铅与乙醇联合作用对雄性小鼠免疫系统的 影响，本课题拟用体内、体外实验的方法，观察铅和乙醇对小鼠免疫功能的 联合作用并初步探讨其作用机理，为保护接触者的健康，进行有效防治提供 理论依据。 实验材料与方法 1．实验动物分组与染毒 昆明种小鼠，雄性，体重22±29，小鼠饲养1w后按体重随机分为4组， 铅和乙醇灌胃，每天1次，连续4W。分别为： 对照组：蒸馏水灌胃； 醋酸铅组：醋酸铅水溶液灌胃，250mg／kgbw； 乙醇组：乙醇灌胃，3．16e,／l酒)w； 联合作用组：用250mg／kg醋酸铅+3．16∥kg乙醇组灌胃。 2。观察指标及检测方法 2．1 一般指标：体重、脾重、胸腺重并计算脏器系数 2．2 法) 2．3抗体生成细胞检测：定量溶血分光光度测定法(QI-IS法) 2．4试管凝集试验 2．5巨噬细胞功能检测 2．5．1大鼠腹腔灌洗液巨噬细胞(PM)数计数 2．5．2大鼠腹腔灌洗液巨噬细胞吞噬功能测定：中性红比色法 2．6脾脏组织病理学检测 2．6．1光镜观察：脾脏经10％福尔马林固定，常规制片，HE染色，光 镜下观察； 2．6．2电镜观察：脾脏经2．5％戊二醛固定，树脂包埋，超薄切片．醋 酸铀及柠檬酸铅染色，透射电镜下观察超微结构的改变。 3．数据处理 采用SPSS统计软件进行统计学分析，实验数据用i±s表示，各指标比 较，用单因素方差分析，随后采用LSD法进行两两比较。 实验结果 1．各组小鼠体重、脾重、胸朦重及脏器系数 各染毒组体重均较对照组低，但铅组、乙醇组与联合作用组之间没有差 别；各染毒组之间脾的绝对重量及相对重量都无差异。各染毒组胸腺重均 较对照组低，且铅组和联合组的胸腺绝对重量与对照组相比有差异，但各染 毒组脏器系数与对照组相比无差异。 2．铅和乙醇对小鼠细胞免疫的影响 各染毒组的细胞增殖功能都显著下降，而联合作用组的增殖功能与铅 组和乙醇组相比下降更明显。 3．铅和乙醇对小鼠体液免疫的影响 染铅组和联合作用组的分泌抗体功能显著下降，乙醇组的分泌抗体功 麓下降不明显，而联合作用组较乙醇组下降明显；试管凝集试验中，各染毒 -2· 组抗体水平都下降，但各染毒组之间无差别。 4．铅和乙醇对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 各染毒组巨噬细胞数与对照组相比没有差别；但铅组与乙醇组的吞噬 功能明显降低，而联合作用组较铅组与乙醇组又升高，且与乙醇组有显著性 差异。 5．脾脏组织病理学改变 5．1光镜下改变 对照组细胞分布均匀，结构正常。染铅组小鼠脾脏淋巴组织减少，融合 细胞较多；染乙醇组小鼠脾脏淋巴组织减少，可见细胞溶解；联合组小鼠脾 脏淋巴组织减少，细胞溶解更明显。 5．2电镜下改变 对照组淋巴细胞边界清楚，核、线粒体及内质网均正常。染铅组小鼠淋 巴细胞核间隙增宽，出现核固缩、核碎裂，线粒体严重空泡变性；染乙醇组小 鼠脾脏淋巴细胞大量核固缩、核碎裂，偶见细胞坏死，线粒体严重空泡变性， 内