灵龟八法按时开灸对衰老模型豚鼠超氧化物歧化酶活性及其蛋白表达的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要 1 英文摘要 3 引 言 6 正 文 7 1 实验材料 7 1.1 实验动物 7 1.2 主要药品和试剂 7 1.3 各种抗体 7 1.4 实验器材 7 2 实验方法 8 2.1 动物分组 8 2.2 各组处理方法 8 2.3 衰老模型豚鼠制作 ………….9 2.3.1D-半乳糖溶液的配制……9 2.3.2 模型制作步骤及选用标准………………………………………...9 2.4 标本采集 .10 2.4.1 豚鼠血清的采集 .10 2.4.2 豚鼠肾组织的采集 .10 2.5 指标检测 .10 2.5.1 血清SOD 活性测定方法 .10 2.5.2 免疫细胞化学法对肾组织 SOD 蛋白表达的测定方法 .10 2.5.3 免疫印迹(western blot)分析检测肾组织SOD 的蛋白表达11 2.6 统计学处理 .14 3 实验结果 14 3. 1 各组豚鼠血清SOD 活性的变化…………………………………. 14 3.2 各组豚鼠肾组织SOD 蛋白表达的比较15 3.2.1 免疫细胞化学法15 3.2.2 蛋白免疫印迹法17 4 讨论…18 4. 1 医学对衰老的研究…………………………………………18 4.1.1 现代医学关于衰老机理的主要学说概况18 4.1.2 自由基学说18 4.1.3 现代药物干预及评价20 4.2 祖国医学对衰老的研究……………………………………21 4.2. 1 国医学对导致人体衰老产生因素的认识21 4.2.2 祖国医学延缓衰老的医学模式23 4.2.3 祖国医学延缓衰老的方法23 4.3 选题依据25 4.3.1 灵龟八法与延缓衰老25 4.3.2 神阙穴与延缓衰老31 4.3.3 灸法与延缓衰老……31 4.3.4D-半乳糖致衰老动物模型的建立32 4.3.5 超氧化物歧化酶（SOD ）作为实验指标的意义34 4.4 实验结果与分析35 4.4.1 对衰老模型豚鼠血清SOD 活性的影响 …35 4.4.2 对衰老模型豚鼠肾组织SOD 蛋白表达的影响……35 4.4.3 预防组组间及治疗组组间疗效比较分析 36 4.5 存在的问题及展望36 结 论 .38 参考文献 .39 综 述 .43 致 谢 50 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 51 声 明 52 个人简历 53 中 文 摘 要 目 的：观察灵龟八法按时开穴灸对衰老模型豚鼠超氧化物歧化酶 （SOD ）的影响和作用机理。 方 法：以健康成年豚鼠为研究对象，随机分为Ⅰ组（空白对照组）、 Ⅱ组（模型对照组）、Ⅲ组（灵龟八法预防组）、Ⅳ组（神阙预防组）、 Ⅴ组（灵龟八法治疗组）、Ⅵ组（神阙治疗组）等6 组。采用D-半乳糖 连续腹腔注射42 d 制作亚急性衰老的动物模型，从预防和治疗两方面观 察各组豚鼠血清 SOD 活性及肾组织 SOD 蛋白表达的影响。通过对艾灸 “神阙”与灵龟八法按时开穴灸进行比较，观察两者对以上指标影响的 差异。 结 果：造模后Ⅱ组与 Ⅰ组比较血清SOD 活性降低明显 (P0.01)；Ⅲ组、 Ⅳ组在造模同时进行艾灸疗法预防后与Ⅱ组比较血清SOD 活性明显升高 （P0.01 ）；Ⅴ组、Ⅵ组在造模后经过艾灸疗法治疗后与Ⅱ组比较血清 SOD 活性明显升高（P0.01 ）；Ⅲ组与Ⅳ组两个预防组间血清SOD 活性 比较差异无显著性意义（P ＞0.05 ）；治疗组Ⅴ组较Ⅵ组血清 SOD 活性 升高，差异有显著性意义（P0.05 ）。免疫细胞化学法可见Ⅱ组肾组织 细胞着色几乎为阴性，只有少数细胞淡染，与Ⅰ组相比差异有统计学意 义 （P ＜0.01)；边造模边灸的预防组（Ⅲ、Ⅳ组）肾组织细胞阳性表达较 Ⅱ组明显增多，染色较深 （P ＜0.01 ）；治疗组（Ⅴ、Ⅵ组）经过艾灸治 疗后，与Ⅱ组相比肾组织阳性细胞表达明显增多，染色较深（P ＜0.01 ）； 预防组组间比较差异不显著（P 0.05 ）；治疗组组间比较有显著差异（P ＜0.05 ）。Western blot 可见Ⅱ组SOD 表达的条带颜色很浅，实验结果与 免疫细胞化学法基本一致。 结 论：灵龟八法按时开穴灸延缓衰老机理可能与调节SOD 活性及其蛋 白表达密切相关，其对衰老模型豚鼠具有