温阳活血利水法足细胞骨架蛋白信号通路影响的研究.pdfVIP

中文摘要 目的：观察温阳活血利水法对阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞的骨架蛋白 CD2AP、a-act in表达的影响． 探讨温阳活血利水方如何通过Ncphrin到足突骨架蛋白及接头蛋白，以 及信号转导途径治疗儿童肾病综合征的作用机制． 15士1 方法：SPF级sD雄性大鼠42只，体重15克，将其适应性喂养十天， 使其体重增至200±30克，按随机分层分组的原则将其分为4组，其中中 药组12只、正常组6只、强的松组12只、模型组12只，除正常组外，其 余各组均采用阿霉素(ADR)5．5mg／kg一次性尾静脉注射，诱导一种类似 人类微小病变型肾病综合征的大鼠肾病模型，正常组尾静脉一次性注射生 理盐水1毫升．注射ADR一周后开始治疗，中药组每日一次经胃灌服温阳 活血利水方颗粒剂混悬液3毫升，强的松组按12mg／kg·d，经胃灌服强 的松悬液3毫升(强的松剂量同前)，正常组和模型组每日灌服3毫升生 理盐水，均持续4周．观察实验大鼠的体重、二便、水肿、舌质等一般情 况；造模前、造模后第1周末及第5周末分别测大鼠24小时尿蛋白定量； 实验第6周末处死大鼠取材．(1)麻醉后心脏取4ml血，分离血清，检 inin-4、 疫荧光染色测定各组大鼠肾小球足细胞中骨架蛋白CD2AP、a-act in的表达水平．(3)取肾组织光镜检测 synaptopodin、Arp3及cortact 组织形态学变化；电镜下检测超微结构变化． 结果： (1)一般情况：正常组大鼠毛发润泽，活动自如，精神状态较好， 食欲佳．其余各组大鼠注射阿霉素10一14天后大鼠出现体重不增，反应 迟钝，活动明显减少，弓背蜷缩，聚堆，体毛稀疏，甚至片状脱落，进食 量及饮水量明显减少，时有便溏。注射阿霉素15天后大鼠开始出现四足 水肿，足、尾红紫，舌质紫暗．治疗期间，各治疗组分别用中药、强的松 治疗2周后大鼠反应逐渐好转，进食及饮水量较前增加，活动增加；其中 中药组尿量明显增多，体重缓慢回升．强的松组大鼠表现为躁动不安，易 激惹，攻击性强。 (2)尿液及血液检测结果：造模后I周，各造模组大鼠24小时尿蛋 白定量与注射前比较有所升高，两周后增加明显。温阳活血利水方和强的 松在治疗4周后能显著降低阿霉素肾病大鼠的尿蛋白水平，而中药组和强 的松组之间无明显差异。阿霉素肾病大鼠存在明显的低蛋白血症和高脂血 症，温阳活血利水方和强的松都能在治疗5周后升高阿霉素肾病大鼠的血 清蛋白水平，但仅温阳活血利水方能降低其血清脂质水平． (3)免疫荧光染色：阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞蛋白CD2AP、 松能在一定程度上抑制四种骨架蛋白表达的下降，而模型组及治疗组 a-act inin-4的表达均无改变，但其分布存在差异。 (4)病理：温阳活血利水方可以有效改善阿霉素肾病大鼠肾组织足 细胞的足突融合． 结论：温阳活血利水方可以降低阿霉素肾病大鼠的蛋白尿；控制胆固 醇、血脂；增加血清总蛋白；减轻其肾组织足细胞的足突融合；抑制阿霉 表达的下降； 关键词温阳活血利水方；微小病变型；肾病综合征；足细胞；骨架蛋白； 信号通路； Ⅱ ThelesearchOnTheBffectOf Protein PodocyteCytoskeletal Signaling Diuresis PathwayByWcnyanghuoxu8 SpeciaIity：TraditionalChineseMedioine Author：XiaoLang Tutor：Lu Yanfang 人BSTRACT the ofthe OBJBCTIYB：Obser