独活抑制阿尔茨默病aβ大鼠模型免疫炎性损伤的实验研究.pdf

摘 要 专业：中医基础理论 研究生：张杰 导师：李德新教授 diseases 阿尔茨海默病(Alzheimers AD)是发生在早老及老年期、不可逆转 的、渐进性的、以精神行为异常为主的脑变性疾病，晚期可危及患者的生命，其 发病率和死亡率逐年上升。在本病的病理机制的多种假说中，免疫炎症假说得到 了学者的关注。。近年来发现非甾类抗炎药对本病具有一定的治疗作用，进而使 本病的本病在中医属痴呆的一种，中医多认为以五脏虚损为本，湿痰瘀为标，本 研究以祛风胜湿药独活为本病治疗的切入点，采用非甾体抗炎药为对照，探讨独 活在抑制阿尔茨海默病炎性损伤中的作用。 目的：本研究旨在探讨独活在抑制阿尔茨海默症AIS模型大鼠炎性损伤的作 用环节，观察独活对模型鼠脑内炎性细胞因子、信号转导通路及凋亡蛋白的影响， 探讨祛风胜湿药独活的作用机制为应用祛风除湿法治疗AD提供现代科学依据。 方法：采用AB蛋白大鼠海马内注射模型，分别予以吲哚美辛、独活、丹参 及生理盐水灌胃，四周后，水迷宫实验观察药物对模型鼠学习记忆能力的影响。 并以光镜、电镜观察模型鼠脑内神经元形态学的改变；采用免疫组化方法，测得 不同组别的大鼠脑内IL-I、IL一6、TNF—a、INOS、NF-KB蛋白的表达差异；以 western-blot方法测不同施加因素对大鼠脑内凋亡蛋白Bcl-2、Bax的影响； 并通过观察对p38MAPK信号转导通路的影响，来探讨独活的作用机制。 结果：给药后除模型组、假手术组外，各组大鼠与给药前比较，逃避潜伏期 均有缩短(#P0．05)。说明3种药物对Ap大鼠的学习记忆能力有改善作用。 MAPK表达较模型组有所降低，差异显著(P0．05)， 独活组及西药组的p38 MAPK表达水平较丹参组降低，但差别不显著(P0．05)。丹 独活组、西药组p38 参组与模型组比较，p38 MAPK表达有所降低，但差别不显著(pO．05)。在细胞 因子方面，模型组与假手术组比较TNF—a、IL一1、INOS、NF-KB及IL一6有一较 高水平的表达，说明大鼠脑内注射AB蛋白使大鼠脑中上述细胞因子的分泌明显 增加，西药组、独活组、丹参组与假手术组、模型组比较，差异显著(P0．05)， 提示三药均能对AB大鼠脑中上述指标的表达有很好的抑制作用，但不如假手术 组，(丹参组NF-KB的表达同模型组)。丹参组、独活组及西药组比较i差异不 显著(PO．05)，说明在两种药物在抑制上述指标的表达上差别不显著(P0．05)。 丹参组在对凋亡蛋白的调控上，丹参及独活均能上调bcl-2的表达，抑制Bax 基因表达，提高Bcl-2／Bax的比值，西药吲哚美辛作用弱于此两味药，说明吲哚 美辛可以抑制脑内炎性反应，但对抑制凋亡作用不及丹参及独活。 结论：l、阿尔茨海默证是以五脏虚损为本，湿痰为标，祛风胜湿药独活可 以通过干预阿尔茨海默病的免疫损伤机制，而发挥治疗作用。2、祛风胜湿药之 独活可改善邮大鼠的学习记忆能力，并通过抑制A13大鼠脑中IL-1、IL一6、TNF—A 等细胞因子的表达，从而减轻邯大鼠脑中炎性反应；对邮大鼠脑中核转录因子 NF—K b具有调节作用，降低脑中INOS的表达，进而减轻大鼠脑内炎性反应、细 胞凋亡、氧化应激等反应，减轻神经元细胞的损害。可通过抑制p38MAPK信号通 路的转导及调控凋亡蛋白以减轻脑中的免疫炎性反应，从而抑制细胞凋亡。 关键词： 阿尔茨海默病独活免疫炎性损伤实验研究P38-MAPK祛风胜 湿法 ABSTRACT ofTCM Jie Li Profession：basic Tutor：Professor theory Graduate：Zhang Dexin Alzheimer diseasesthebrain’S diseasewhich disease(AlzheimersAD