2012-10-研究生课时-色谱技术发展及其应用.ppt

研究生学科知识讲座 色谱技术发展及应用 主要内容 色谱法的发展 质谱法的发展 气相色谱法及气质联用 液相色谱法及液质联用 色谱法的发展历史 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作 色谱法分类 色谱法分类 按两相的物理形态、分离机理等分类 色谱法特点及与其他分离分析方法比较 （1）色谱、精馏与萃取：平衡分离方法。 （2）色谱法与精馏、萃取比较：速度快、效率、选择性高。 （3）精馏不能分离沸点相同的组分，萃取不能分离在溶剂中溶解度相同的组分；色谱法可分离沸点、溶解度相同的组分，可分离物理、化学性质相近、其他分离方法不能或难以分离的组分。 （4）色谱法每次处理样品量少。 与化学分析比较 （1）不受化学性质限制，是一种分离分析方法。 （2）化学分析本身不具备分离功能。 （3）化学分析一般不适用于分析多组分的混合物。 （4）化学分析定量方法简易；色谱法定量测定较复杂。 与光谱、质谱方法比较 （1）光谱、质谱用于物质定性鉴定，色谱法定性功能差。 （2）色谱法最主要特点是适于多组分复杂混合物分离分析。 （3）色谱仪价格比分子光谱、质谱仪低得多，适用范围广。 （4）色谱检测器比分子光谱法灵敏度更高，比质谱灵敏度低。 现代分离方法两重含义 样品前处理方法：各种提取、分离技术 液液提取LLE、液相微萃取LLME 固相萃取SPE、固相微萃取SPME 微波辅助溶剂提取、加速溶剂提取 超声辅助溶剂提取…… 现代分离分析方法: 气相色谱GC、高效液相色谱H(U)PLC、 毛细管电泳CE、超临界流体色谱SFC…… 复杂样品分析思路 获取样品中所有或大多数组分的信息 基因组学、蛋白组学、代谢组学、中药分析等 获取样品中一个或多个组分的信息 环境污染物分析、食品中农药兽药分析、体液中药物分析、材料分析等 举例：Journal of Chromatography B, 881– 882 (2012) 34– 41 Development and validation of a sensitive solid-phase-extraction (SPE) method using high-performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry (LC–MS/MS) for determination of risedronate concentrations in human plasma 二、质谱法的发展 1918年J.J.Thomson发明了第一台质谱； 1966年Munson和Field提出了CI电离技术； 1981年出现了快原子轰击（FAB）电离技术； 随后出现了各种软电离技术： 如基质辅助激光解吸电离源（MALDI）； 电喷雾电离源（ESI）； 大气压化学电离源（APCI）； 感应耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）； 富立叶变换质谱仪（FT-ICR MS）； …… CI电离规律： CI电离与样品化合物类型及反应气体有关： （1）反应气体影响： 甲烷：有[M+H]+、[M-H]-、[M+C2H5]+或[M+C3H5]+ 异丁烷：有[M+H]+、[M+C4H9]+ 氨：有[M+H]+、[M+NH4]+　　 （2）化合物结构影响： 电负性强的元素电子捕获（或再分解）生成负离子：有 [M]-、[M-H]-及其分解离子。　　 CI源会产生一些碎片离子，碎片会进一步离子-分子反应 CI源特点： 解释CI谱时，要综合分析CI谱、EI谱和所用的反应气，推断出准分子离子峰。 3. 大气压电离 （Atmospheric pressure ionization, API） 样品从具有雾化气套管的毛细管端流出时在电场和雾化气的吹带作用下喷成无数的带电微液滴，一定温度下，液滴中的溶剂快速蒸发，液滴直径不断变小，表面电荷密度不断增大。最终使溶剂和样品离子从液滴中被排挤出，样品离子进入分析器被检测。 ESI源离子类型 有机小分子（1000Da以下）： 一级质谱（MS）：单电荷准分子离子，很少碎片 （1）分子离子峰：[M]+或[M]- （2）准分子离子峰（加合离子）：和溶液组成有关 [M+H]+、[M-H]-、[M+Na]+、[M