第八章 DNA重组与转座资料.ppt

DNA重组与转座;概述;概述：; DNA重组 —DNA分子内或分子间发生遗传信息的重新组合。 （1）同源重组 （2）位点特异性重组 （3）转座重组 （4）异常重组;? 重组DNA技术 ;第一节 同源重组;1、 同源重组（homologous recombination）: 发生在同源DNA序列之间;;双倍体染色体交换;二 同源重组的分子模型;Synapsed chromatids;Recombination joint;;;5‘;3‘ 5‘;双链断裂修复模型 ;2、 分枝迁移和Holliday中间体结构的拆分;Holliday的异构化;（1）;“亲本链-片段重组体”;三、原核同源重组（E.coli）;3‘;e、 RecBCD 切割产生3’单链末端; 2、RecA 蛋白;;RecA;;RecA引起的链交换和Holliday结构的生成 ; （2）RecA 蛋白催化双链和单链 DNA 的反应阶段;;? RecBCD 和 RecA 的共同作用; 3、原核同源重组的其它蛋白;? E.coli 重组的各阶段 （损伤修复）;第二节 位点专一性重组;一、位点专一性重组（ site-specific recombination）;二、λphage的整合与切除;3、整合过程;溶源性细菌 (lysogen);;4、整合分子机制;int;? 整合体及其作用 整合体（intasome）--- Int和IHF结合到attP时的复合物;? Int蛋白能切断DNA，并使它重新连接，近而使holliday结构拆分;5、整合与切除的控制;细菌的特异位点重组——鼠伤寒沙门氏杆菌鞭毛蛋白H1和H2转换;四、依赖于同源重组的位点特异性的序列代换 -----酵母MAT序列的转换;2、 同源序列;3、 转换过程;? Y区域被降解，直到Yα和Ya相同的部分或一直到X区域;? 四个断头侵入供体匣子的同源部分并与其中互补链配对;? Holliday结构的拆分，产生新的MAT匣子和这次转换中的供体匣子;4、 特征---同源重组和位点特异性重组特征都具有;第三节 转座作用;一、转座子概述;;? 基因转座现象的再次发现与证实 ;A酶活性 ; 20世纪60年代末期,在不同实验室发现一系列可转移的抗药性转座子 1983年Barbara McClintock被授予诺贝尔生理学与医学奖。;a) 不依赖供体序列与靶位点间序列的同源性;二、Prok.转座子种类;? 特点： a）两端IR为转座酶的识别位点（突变） b）插入靶位点后会出现靶位点的正向重复（3～9bp）;? IS 可以正反方向插入到DNA（宿主、质粒??某些噬菌体）， 常对插入位点后面的基因表达功能产生极性效应;a) Tn / TnA family ; b）两端重复序列为IS的复合转座子;? 当两个IS组件相同时，其中任一个都可行使转座功能;3 转座噬菌体 Mu phage （巨型转座子 ） ;? Mu的插入途径;三、转座子的转作机制及模式;? 两大步; b) 拆分;;2、非复制型转座模式;3、保守型转座模式;4、TnA转座模式; ;四、转座子转座频率的调控; a） 通过反义RNA的翻译水平控制; b） 甲基化作用控制转座酶合成及其与DNA的结合;五、转座子的某些遗传学效应; 真核生物的转座成分根据转座机制目前分为两类：;逆转录转座子;;逆转录转座子与简单转座子比较;逆转录子的结构特点;逆转录子的生物学意义;;复习题