低剂量青蒿素模热量限制延寿及保护端粒机理研究.pdfVIP

中文摘要 目的 尽管CR是当前公认的非遗传、非药物延寿的有效手段，但其作用机理仍未阐明。 有人认为CR可能通过一氧化氮(NO)促进线粒体增生发挥延寿效果，但目前对此还 有争议。为此，本研究提出“N0介导线粒体解偶联与低毒兴奋效应”假说，初步探讨 CR诱导的N0对酵母时序寿命及小鼠端粒长度的影响，并利用低剂量青蒿琥酯(ART)、 过氧化氢(H：0。)等CR模拟化合物探究解偶联与低毒兴奋效应的相互关系，由此阐释 生物延寿及抗衰老的分子机理。 材料与方法 以酿酒酵母为材料，采用菌液梯度稀释及连续培养法观察ART(血红素结合剂) 或H20。(氧化剂)模拟CR的延寿效应。为了验证解偶联与抗氧化的对应关系，定量测 定了酵母细胞色素C氧化酶(COX)及抗氧化酶的表达水平和酶促活性的变化，通过 对酵母全基因组表达谱芯片分析，跟踪CR、ART、H20。处理过程中主要代谢产物的合 成代谢与分解代谢动态。 采用Western印迹法和酶联免疫吸附测定法对信号转导分子、线粒体标志物、抗氧化 酶等进行蛋白质水平的定量分析，同时对泛素化信号转导途径进行基因芯片分析，考 以末端片段扩增法测定染色体端粒长度，由此判断DNA损伤及修复程度。 结果 lOOnmol／LART能模拟CR明显延长酵