健脾益气方调控SAIDs胃粘膜损伤COX--2信号中CREB蛋白通路转导研究.pdfVIP

摘 要 研究目的： 本次实验研究目的：健中愈疡片在临床治疗中取得良好疗效，为广大患者解除病 痛，尤其是对非甾体类抗炎药引起的急性胃黏膜损伤患者，缓解症状，减轻病痛。仅 为进一步研究本制剂治疗非甾体类相关胃病的作用机制，为进一步临床应用及实验研 究打下良好基础。 研究方法： 鼠分为6组，正常对照组10只，模型组、香砂养胃丸组、健中愈疡片高剂量组、健 中愈疡片低剂量组分别为20只，西药组(奥美拉唑)20只。 第二步：动物造模及给药：正常组给予常规喂养，其余各组给予按照体重不同给 予相对应的药物，治疗7天。7天后开始使用消炎痛造模，如西药组给予奥美拉唑， 香砂养胃丸组给予香砂养胃丸，并在造模后7小时内将各组大鼠取一半(除正常组外)， 进行取胃观察，观察胃粘膜损伤情况，同时用试剂进行测试，其余大鼠同前喂养方式， 坚持给药，待7天后再次取胃观察，检测胃粘膜物质。 第三步：采用免疫印迹(westernblot)法，每组称取250rag胃黏膜组织提取蛋白 质，取等量蛋白质，SDS—PAGE电泳，转至硝酸纤维素膜，封闭，分别加入I抗(美国 SantaCruz Biotech生产)：COX一2多克隆抗体、兔抗鼠CREB多克隆抗体，洗膜， 加入羊抗兔Ig