动物细胞培养(ali).pptVIP

上 节 回 顾 1、阻碍植物细胞杂交的结构？解除阻碍的方法？ 2、诱导原生质融合的方法？原理？植物细胞融合的标志？ 3、如何将杂种细胞培育成杂种植株？原理？植物体细胞杂交成功的标志？ 4、植物体细胞杂交技术的流程？和传统杂交育种相比，植物体细胞杂交技术的优点？ 5、微型繁殖属于哪种繁殖方式？优点？ 6、作物脱毒的选材？单倍体育种的步骤？优点？ 7、突变体的获得利用的是什么原理？培养细胞一直处于分生状态指的是哪一时期的细胞？ 阅读课本44页第一段，回答问题： 动物细胞工程常用的技术手段 其中， 是基础。 原代培养： 人们常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。传代培养： 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程）细胞株： 传代细胞一般能传到40-50代，遗传物质一般不会发生改变，叫细胞株。细胞系： 传代50代以后不能再传下去，部分细胞遗传物质发生了改变，能连续传代，获得不死性，叫细胞系。 液体合成培养基：（葡萄糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）等；通常还需加入血浆、血清等天然成分。 复 习 回 顾 1、动物细胞工程常用的技术手段？基础技术？ 2、动物细胞培养的原理？培养的材料取自？取材原因？ 3、动物组织块的处理？所用酶种类？使用该酶的目的？ 4、动物单个细胞加入营养液制成？目的？ 5、动物细胞生长的特点？原代培养与传代培养的区别？能无限增殖的细胞是？ 6、动物细胞培养的条件？O2与CO2的作用？抗生素的作用？营养成分？血清、血浆的作用？ 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物（阅读课本47页） 1、概念： 3、 克隆：指从一个共同的祖先，通过无性繁殖的方式产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。 克隆包括三个层次 分子水平：如PCR扩增DNA 细胞水平：如动物细胞培养 个体水平：如克隆动物 在克隆羊多利的过程中，没有运用到下列哪项技术（ ） A、细胞培养技术 B、细胞核移植技术 C、胚胎移植技术 D、基因工程技术 下列关于体细胞克隆的叙述中，错误的是（ ） A、供体为体细胞的细胞核 B、受体为去核的卵母细胞 C、细胞核移植是体细胞克隆的关键步骤 D、克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型完全一致 * 动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体 动物细胞培养 一、动物细胞培养 1、概念： 2、原理： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖. 细胞增殖 动物组织块 制成细胞悬液 传代培养 胰蛋白酶处理分散成单个细胞（原因） 幼龄动物的器官组织或胚胎（原因） 用胰蛋白酶等处理贴壁细胞 适宜条件，原代培养 3、动物细胞培养的过程 （原因） 细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养 使细胞与培养液充分接触，利于吸收营养 加入培养液 细胞间的物质主要是蛋白质 细胞生长特点：接触抑制，贴壁生长 强调一：细胞贴壁过程 ■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 强调二：接触抑制 不死性细胞 4.动物细胞培养的条件（阅读课本46页）: 1）无菌无毒的环境： 适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度为36.5±0.5℃。 适宜的酸碱度：PH：7.2-7.4 4）气体环境： 2）营养： 3）温度和pH： “95％空气+5％CO2”的混合气体培养箱。 氧气是细胞代谢必须的； CO2维持培养液的PH。 对培养液和所有培养用具无菌处理；培养液中添加抗生素防止培养过程中污染；定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。 5、动物细胞培养技术的应用（阅读课本46-47页）: 1）蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2）基因工程技术中常用的受体细胞 3）检测有毒物质，判断某种物质的毒性 4）细胞的生理、药理、病理研究 如用于筛选抗癌药物 获得细胞或细胞产物 细胞的全能性 细胞群体 植物体 培养结果 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性