糖化酶活力测定()要点.pptVIP

实验三 糖化酶活力的测定 一、目的和内容 目的：掌握测定糖化酶活力的方法和学习测 定的原理 内容：１.测定糖化酶活力． 　　　２.计算糖化酶活力． 二、基本原理　 　　　 糖化酶（glucoamylase）又称淀粉葡萄糖苷酶（系统名淀粉α–１，４葡萄糖苷酶，ＥＣ３.２.１.３），是一种外切型淀粉酶，能从淀粉分子非还原端依次水解α–１，４键切下葡萄糖单位。也能水解麦芽糖和支链淀粉分支点的α–１，６键，但水解速度甚慢。该酶能广泛用于酒精、酿酒、葡萄糖及果葡糖浆的制造上．糖化酶是一种胞外酶，可利用黑曲霉、海藻曲霉、和根霉等生产。 测定糖化酶的方法有次碘酸钠法、兰–爱农法（ＳＰ法） 、Schoorl法（ＤＵ法）和对硝基苯酚葡萄糖法（ＮＰＧ法）等方法。本试验测定糖化酶活力采用次碘酸钠法。糖化酶以可溶性淀粉为底物在一定条件下进行反应,反应生成得葡萄糖用次碘酸钠法定量测定。以单位时间内分解α–１，４糖苷键生成葡萄糖所需的酶量为酶的活力单位。当酶的反应条件不相同时,酶活力单位定义也有所差别。糖化酶的最适pH范围是4～5,最适应温度范围是50～60℃。 次碘酸钠法 碘与NaOH作用能生成NaIO(次碘酸钠,弱氧化剂),而C6H12O6 (葡萄糖)能定量地(1:1)被NaIO氧化.在酸性条件下,未与C6H12O6 作用的NaIO可转变成