染料木素的乳糖苷化修饰及其产物的结构表征和体外活性研究.pdf

摘要 摘要 染料木素是大豆异黄酮中最具代表性的三羟基异黄酮，许多体外癌细胞培 养研究证实，染料木素对乳腺癌、胃癌、肝癌、白血病及其它一些癌细胞系的生 长、增殖具有抑制作用。治疗肿瘤最关键的是抑制肿瘤细胞的转移，Raz和Lotan 证实在肿瘤细胞的表面存在与乳糖相连的凝集素，因此可以通过乳糖衍生物来 阻断肿瘤细胞之问以及肿瘤细胞与宿主细胞之间的认知相互作用来防止肿瘤细 胞的转移和扩散。乳糖还可以与肿瘤细胞表面受体结合，使结合乳糖的细胞毒 药物可以长时间富集于肿瘤细胞附近，起到定向和协同治疗的效果。因此，将 乳糖以糖苷的形式引到染料木素母体上，以期望乳糖的这种定向作用及乳糖与 染料木素母体之间可能存在的协同作用而使形成的新化合物具有更好的抗癌活 性，是本论文研究的主要课题。 本论文从改善染料木素在机体内作用的靶向性出发，对染料木素进行了乳 糖糖苷化修饰。采用相转移催化的方法，以染料木素和溴代乙酰乳糖为原料， 在稀碱溶液和二氯甲烷二相体系中，以四丁基溴化铵为相转移催化剂，首次合 成了染料木素不同位置不同取代数目的染料木素乳糖苷，用聚酰胺和Sephadex LH．20柱层析联用的方法分离得到了两种染料木素乳糖糖苷化修饰物，用I＆ MS，1HNMR,和”C NMR等谱学手段对其结构进行了表征，确定其为染料木素 7-O．13．D．吡喃乳糖苷和染料木素7，4O．B．D一吡喃乳糖苷。 在此基础上，对染料木素7，4t．二．O．O．D．吡喃乳糖苷和染料木素的三种体外 活性进行了研究。采用连苯三酚的自氧化法，Fenton反应邻菲罗啉光度法和 DPPH·自由基方法，研究了其清除超氧自由基、羟基自由基和DPPH·自由基的能 力。结果表明两种化合物对三种自由基均具有一定的清除能力，且在同一浓度 条件下染料木素7，4’一二一O-D．D．吡喃乳糖苷对三种自由基的清除能力都稍强于染 料木素。 采用滤纸片法研究了两种化合物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠 杆菌、变形杆菌、根霉、毛霉和曲霉等7种食品中常见微生物的抑制活性。结果 表明这两种化合物对革兰氏阳性细菌(枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌)，革兰 氏阴性细菌(大肠杆菌和变形杆菌)和真菌(根霉、毛霉和曲霉)均具有抑制活 性。对同一种微生物来说，两种化合物的抑制活性差别不大。 采用了紫外法光谱法，荧光法光谱法和粘度法对两种化合物与DNA相互 II 作用方式进行了研究，为两种化合物抗癌活性的研究提供一定的实验依据和有 价值的参考信息。结果表明两种化合物与DNA存在弱的相互作用，其主要作用 方式为沟面结合和静电结合的方式。 同时用荧光法研究了染料木素和染料木素7，4’一二．O—B．D一吡喃乳糖苷与牛血 清蛋白(BSA)的作用的荧光猝灭方式，并计算其猝灭常数和结合常数。确定两 种化合物对BSA的猝灭方式为形成了复合物的静态猝灭。染料木素与BSA作用 素7,4’．二．O．B．D．毗哺乳糖苷与BSA作用的猝灭常数和结合常数分别为6．33× 1012L．mol～．S’1和6．60x104L．mol～。 关键词： 相转移催化；染料木素；乳糖苷：化学修饰；自由基：DNA；BSA 抑菌 ⅡI 摘要 Abstract Genisteinisthe of isoflavonein 3-droxide presentative soybean．The inhibitory of onbreast andother cancer,leukaemiacancerhasbeen genistein cancer,gastric tumor