超氧化物歧化酶(SOD)分析.ppt

唯一可临床常规使用的检测机体抗氧化活性水平的指标：超氧化物歧化酶（SOD） 问题 新项目还是老项目？ 项目的临床意义 项目的特异性 实例 SOD与肾功-新发现 SOD用于肾病检测与其它指标的比较 目前全国已开展此项目的部分代表性医院 北京协和医院 北京301医院 北京医院 上海新华医院 上海仁济医院 中山大学附属第一医院 广东省人民医院 … 方法学的突破 原有方法： 放免法 酶免法 手工方法 生化干粉 缺点：没有注册证、或者试剂不稳定、操作不便 新方法： 比色法 试剂非常稳定（开瓶稳定30天，CV2%） 使用SOD生化法发表的文章 SOD检查方法学评价 方法学评价内容 精密度实验 线性评价 试剂稳定性试验 抗干扰实验 携带污染试验 参考范围试验 临床标本实验 透析标本 肿瘤标本 精密度 选择2个水平的样本批内检测5次，重复4批，其中一个浓度样本为中值，另一浓度样本为高值，分别计算批内、批间均值、标准差、变异系数和偏差。 线性评价 以高值样本为原液，用蒸馏水稀释配制出从低到高4个浓度样本，加一个空白，按照浓度由高到低的顺序，选择5个浓度水平，对每一稀释浓度样本重复测定3次，分别求得测定均值。以理论值为自变量，以测定均值为因变量求出线性相关系数R。 试剂稳定性试验 在一个月左右的时间里，对2个水平的质控品进行重复测定，看变异和偏差程度。 抗干扰实验 携带污染 SOD基础介绍 氧化与抗氧化平衡 人体（体液）平衡为人体正常新陈代谢所必需，包括水平衡、渗透压平衡、电解质平衡、酸碱平衡、凝血与抗凝血平衡、氧化与抗氧化平衡等。 氧化抗氧化平衡发生紊乱后，会导致人体一系列的疾病。 氧化与抗氧化平衡紊乱本质上为体内自由基与清除酶系统失衡紊乱，造成体内自由基代谢异常。 自由基代谢异常的危害 自由基是具有不成对电子的原子或基团 浓度很低，存留时间很短，非常的活泼 自由基致病机理 当人体内的自由基含量偏离正常范围而异常剧增时，人体自由基平衡系统随即发生紊乱，表征人体内某脏器区域自由基有大量高积蓄，此时自由基即成为了致病因子。 自由基通过对细胞、生物膜的损伤，引起血氧通路堵塞、钙超载、细胞组织坏死凋亡或病变等一系列病理现象，可造成亚健康、早衰或脏器疾病（如心脑血管疾病、恶性肿瘤、糖尿病、神经退行性疾病、动脉粥样硬化等）的发生、发展。自由基平衡系统持续紊乱时，还会诱发细胞组织DNA基因突变甚至癌变。 超氧化物歧化酶（SOD） SOD是人体内唯一以自由基为底物进行歧化反应的酶，是自由基的清除剂，它与自由基代谢状态呈负相关。 自由基平衡状态时血清SOD水平为：110～215U/ml SOD检查临床应用探讨 临床意义 评估自由基损伤的严重程度 拟定合适的干预方案 进行病人恢复情况的监测 临床标本（肿瘤） 肿瘤病人的SOD普遍偏低，在43个肿瘤病人中，低于110U/ml的肿瘤病人有38个，占比为88.37%。 SOD与其它疾病 1）缺血性心脏病 动脉粥样硬化 心肌缺血 急性心肌梗塞 自由基与动脉粥样硬化 机体中脂质氧化与自由基的作用密切相关，其中低密度脂蛋白（LDL）被自由基氧化修饰成为氧化型LDL（ox-LDL）后，能抵抗溶酶体酶和组织蛋白酶对其的降解，造成LDL在细胞内堆积，对AS有关键作用。 自由基通过对血管内皮细胞 （VEC）的损伤、对铁氧化产生的氧化应激、促血管平滑肌细胞（VSMC）增殖、促血炎症-氧化应激等机制对AS??的发生发展产生重要影响。 自由基贯穿动脉粥样硬化斑块的形成、发展及斑块破裂触发临床事件的始终。 自由基与动脉粥样硬化抗氧化治疗成为动脉粥样硬化性疾病防治的新焦点 普罗布考是目前可用于临床的抗氧化作用最强的人工合成抗氧化剂。 普罗布考可对抗脂质氧化，降低血浆ox-LDL水平，从而降低多种炎性因子和MMP的分泌与表达，抑制泡沫细胞的形成，延缓动脉粥样硬化斑块的形成发展，稳定已形成的动脉粥样硬化斑块，从而显著降低动脉粥样硬化临床事件的发生。 2）脑部神经疾病和精神障碍 脑血管病 急性脑梗死 脑出血 蛛网膜下腔出血 新生儿缺氧缺血性脑病 外伤 颅脑损伤 老年痴呆和帕金森症 精神分裂症 脑部神经疾病与自由基相关性 急性脑梗死患者缺血期和再灌注后增加的有害活性氧自由基引起的过氧化损伤、蛋白质氧化和DNA损伤是导致病患病情加重甚至死亡的主要原因。 自由基清除剂（如依达拉奉等）用于急性脑梗死的治疗是有效的。 精神障碍患者自由基代谢失衡。 3）缺血再灌注损伤 休克微循环痉挛解除 心脏骤停后心脑肺复苏 体外循环的建立与撤除 动脉搭桥术 经皮腔内冠脉血管成形术（PTCA） 溶栓疗法 器官移植 断肢再植 冠状动脉痉挛解除 缺血再灌注损伤 缺血、缺氧的组织和器官重新获得氧供后反而可出现更严重的损害。氧自由基在再灌注损