植物组织培养实验报告解析.docVIP

植 物 组 织 培 养 实 验 报 告 学院：生命科学技术学院 班级：11生物技术(制品) 学号： 2011192017 姓名： 李 鹏 植物组织培养实验报告 实验一 一 、实验目的二 、实验原理三 、实验材料、试剂和仪器设备 NH4NO3 ,KNO3 ,KH2PO4 ,CaCl2·2H2O ,MgSO4·7H2O,FeSO4·7H2O Na2-EDTA,MnSO4·4H2O,ZnSO4·7H2O,H3BO3,KI,Na2MoO4·2H2O CuSO4·5H2O,CoCl2·6H2O,肌醇，甘氨酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇， 烟酸，蒸馏水2.仪器设备 电子天平，烧杯（50ml、100ml、500ml）量筒（1000ml、100ml、25ml） ， 容量瓶(1000ml、500ml、100ml)，试剂瓶，玻璃棒数支，，称量纸等。NH4NO3 1650 41.25 KNO3 1900 47.50 KH2PO4 170 4.25 MS培养基微量元素母液配制 化合物名称 培养基浓度(mg/L) 称取质量(g) MnSO4·4H2O 22.3 55.7 ZnSO4·7H2O 8.6 21.5 H3BO3 6.2 11.5 KI 0.83 20.75 Na2MoO4·2H2O 0.25 6.25 CuSO4·5H2O 0.0025 0.625 CoCl2·6H2O 0.0025 0.625 MS培养基铁盐母液配制 化合物名称 培养基浓度(mg/L) 称取质量(g) FeSO4·7H2O 27.8 6.95 Na2-EDTA 37.3 9.32 MS培养基有机物质母液的配制 化合物名称 培养基浓度(mg/L) 称取质量(g) 肌醇 100 2 甘氨酸 2 0.2 烟酸硫胺素 0.4 8 盐酸吡哆醇 0.5 10 烟酸 0.5 10 MS培养基钙盐和镁盐母液的配制 化合物名称 培养基浓度(mg/L) 称取质量(g) CaCl2·2H2O 440 11 MgSO4·7H2O 370 9.25 四、 实验步骤1 、计算：计算各化学成分所需要的量。大量、微量和盐类按扩大50倍，定容500ml的配制计算。有机和肌醇按扩大100倍，定容200ml的配制计算。计算后制成配方表。 2、制定标签：裁取适当大小的牛皮纸，用铅笔写上MS，种类，并标明此类母液所含物质，质量，定容体积，扩大倍数吸取量，制备人，制备日期以大量为例如图： 3、大量元素母液的配制 先用量筒量蒸馏水放入 500ml 烧杯中，按照配方表中用量依次分别称取： NH4NO3 ,KNO3 , KH2PO4 , 待第一种化合物完全溶解后再 加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液转移至 500ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至 500ml，然后转移至细口试剂瓶中，贴上标签并置于冰箱中保存备用。微量元素母液的配制按照配方表中用量用电子天平依次称取 MnSO4·4H2O, ZnSO4·7H2O H3BO3, KI, Na2MoO4·2H2O。CuSO4·5H2O和 CoCl2·6H2O先稀释后用移液管吸取,按制备母液 I 的方法逐个溶 解，转移至容量瓶中，然后定容至 500ml，转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明 母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。 铁盐母液的制备 把 FeSO4·7H2O 和 Na2-EDTA 分别置于适量蒸馏水中，加热搅拌使之完全溶解，保持加热，把 FeSO4 倒入 Na2-EDTA 溶液中并搅拌，接近沸腾时停止加热，冷却后调 PH 到 5.5，将溶液转移至 500ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至 500ml，转入细口试 剂瓶中，用力振荡 1～2min，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期， 配制人，并置于冰箱中保存备用。 有机化合物母液的制备按配方表中用量依次称取：,盐酸吡哆醇，烟酸, 甘氨酸，用蒸馏水溶解后定容转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人， 并置于冰箱中保存备用。植物生长物质母液制备 NAA 母液:准确称取 10mg,用少量 1mol/L NaOH 溶解后加蒸馏水定容至 100ml,即 配制成 0.1mg/ml 的 NAA 母液，转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称， 放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。 6–BA 母液配制方法相似，浓度为 2mg/ml五、试验结果分析及注意事项制母液时注意药品只能出不能进。实验二培养基的制备与灭菌一 、 实验目的学习母液法配制培养基二 、 实验原理 组织培养所用的培养基含有植物生长所必需的各类营养物质， 同时也是微生物繁殖的极好场所，因此必须对培养基灭菌处理，以确保