血清总蛋白测定(双缩脲试剂法).docVIP

生物化学实验报告 姓 名： 学 号： 专业年级： 组 别： 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 实验日期 2014-1-21 实验地点 合作者 指导老师 评分 教师签名 批改日期 实验目的实验原理 (H2NOC－NH－CONH2)Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（H2N-OC-NH-CO-NH2），因分子内含有两个邻接的肽键，在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应 ，生成紫红色络合物；蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键（-CO-NH-），同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应，生成的紫红色络合物，且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10～120g/L范围内有良好的线性关系。 材料与方法 a.各管混匀，观察各试管颜色 b.将各试管置于37℃水浴锅中加热20min，观察颜色 c.将试管中的液体倒入比色杯中，置于1100分光光度计的样品槽内，在波长540nm，以空白管调零，测S和U管吸的光度。 d.测定结束后，将比色杯中的样品回收进试管 依据公式算出结果 结果与讨论