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干扰hENT1达增加5-FU在胰腺癌SW1990细胞内浓度
中文摘要
干扰hENTl表达增加5-FU在胰腺癌
SWl990细胞内浓度
东南大学医学院附属中大医院普通外科
研究生:徐建敏导师:刘胜利教授
摘要
目的明确hENTl在5-FU跨膜转运和返流中的作用,以及返流对5-FU在细胞内
浓度的影响。
方法将能特异性下调hENTl的重组及对照质粒用脂质体法转染到SWl990细胞
内,RT—PCR检测llENl’l
100
SWl990细胞,三组细胞均置于含5-FU
SWl990、pSilence-Control mg·L以
的DMEM中温浴。各组取等量细胞刮取液2份,一份用毛细管区带电泳测定
5-FU含量、另一份作平行样本测定蛋白含量,最后计算细胞内5-FU浓度。
mRNA表达水平下调O.5。$W1990
SWl990细胞hENTI
结果pSilence-hENTlSi
组用5.FU温浴后,细胞内5-FU浓度在早期迅速升高,120min后处于平台期。
990组与SWl
pSilence-hENTlcontr01.SWl990组相比无明显差异pO.05)。而
SWl990细胞内5-FU浓度早期上升较慢,但随着时间延长,
pSilence-hENTISi
浓度逐渐升高,120min后细胞内浓度稳定,高于对照组中浓度p0.05)。
细胞向外返流5-FU的主要通道。
关键词:核苷转运载体;RNA干扰;5一氟尿嘧啶;胰腺癌细胞株;毛细管区带
电泳;
英文摘要
hENTI 5一FU
Interferingexpressionraising
concentrationin cancerSWl990cell
pancreatic
XU
Jianmine
Prof.LIU
Surpervisedby Sheng-li
ofGeneral
DepartmentSurgery,AffiliatedZhong-DaHospital,SoutheastUniversity
Abstract
Aim:To theeffectof ontrans-mcmbcrand
investigate hENTI transport
back-flowof5-FUinSWl effect
990 the ofback-flowof5-FUinthe
cell,and
concentrationof5一FUinSWl990
cell.Methods:PSilcnce—hENTl
plasmid
hENTI anditscontrol were
down-regulatedspecifically plasmid separately
transfectedintoSW
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