肝癌HepG2胞IER5基因低表达细胞系的建立及其辐射效应研究.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………5 研究论文肝癌HepG2细胞IER5基因低表达细胞系的建立 及其辐射效应研究 前言………………………………………………………………．10一 刖舌………………………………………………………………．1 材料与方法………………………………………………………．11 结果………………………………………………………………．28 附图………………………………………………………………．33 附表………………………………………………………………．37 讨论………………………………………………………………．38 结论………………………………………………………………．41 参考文献…………………………………………………………．．42 综述原发性肝癌的分子靶向治疗研究进展…………………………．44 致谢………………………………………………………………………52 个人简历…………………………………………………………………53 中文摘要 肝癌HepG2细胞IER5基因低表达细胞系的建立 及其辐射效应研究 摘 要 carcinomaofthe 原发性肝癌(primary liver，PLC，简称肝癌)是临床 上最常见的恶性肿瘤之一。在我国，肝癌在肿瘤相关死亡中仅次于肺癌， 位居第二位。近年来由于三维适型放疗技术的发展，放疗已成为肝癌治疗 的有力武器。辐射敏感性是影响肿瘤放疗效果的重要因素之一，辐射敏感 性受辐射敏感基因调节。为增加肿瘤的辐射敏感性、提高肿瘤放疗疗效， 人们试图从基因层面寻找对辐射敏感的基因。如果该基因在辐射之后出现 表达变化，且这种表达变化能够促进肿瘤细胞凋亡或抑制肿瘤细胞生长， 5)基 那么该基因对肿瘤放疗就很有意义。IER5(ImmediateEarlyResponse 因是早期慢反应基因家族的一员，研究发现IER5基因在肿瘤的发生发展、 调节细胞周期、促进细胞有丝分裂过程中发挥重要作用。我们的前期研究 显示IER5基因在辐射后的裸鼠肝癌组织中呈现高表达，提示IER5基因 可能与肝癌的辐射敏感性有关，在维持肝脏正常生理功能及肝癌的发生、 发展中可能发挥一定作用。 核糖核酸干扰(RNA stranded RNA(double 从而导致靶基因表达沉默，产生相应功能表型缺失的现象。肿瘤的发生与 基因变异或病毒入侵密切相关，应用RNAi技术可关闭某些特异性基因， 从而达到治疗这些疾病的目的。RNAi技术，尤其是应用化学合成的小分 RNA，siRNA)技术是功能基因分析的重要 子RNA干扰(Smallinterfering 方法，因其可能成为肿瘤治疗的重要手段而倍受关注。 细胞周期是指细胞从第一次分裂结束产生新细胞到第二次分裂结束 所经历的全过程，分为间期和分裂期。间期又分为DNA合成前期(G1期)、 前期、中期、后期和末期，末期又称为GO期，GO期是细胞停止分裂， 运转中有两个关键的“检定点”，一个G1／S，一个是G2／M。只有前一阶 中文摘要 段的生理活动完成后，才能通过检定点阶段，进入周期的下一步，一些突 发事件引发的细胞反应能影响驱动细胞周期前进的因子，使细胞周期停滞 在检定点，称为细胞周期阻滞(cellcyclearrest)。 目前国内外对IER5基因的研究不多，该基因的生物学功能尚不明确， 尚乏有关IER5基因与肝癌关系的研究报道，本实验以离体培养的肝癌 基因表达抑制对HepG2细胞增殖、细胞周期及辐射效应的影响，探讨该 基因的生物学功能，探求该基因能否成为肝癌的辐射敏感基因，期望为临 床肝癌放疗寻找到新的增敏靶点，以提高放疗效果，改善肝癌患者的预后。 目的： 抑制对