生物化学 课本答案.doc

第二章 蛋白质 一、课后习题 1. 用对与不对回答下列问题。如果不对，请说明原因。 （1） 构成蛋白质的所有氨基酸都是L 型的。 （2） 当谷氨酸在pH4.5 的醋酸盐缓冲液中进行电泳时，它将向正极移动。 （3） 如果用末端测定法测不出某肽的末端，则此肽必定是个环肽。 （4） α-螺旋就是右手螺旋。 （5） β-折叠仅仅出现在纤维状蛋白质分子中。 2. 已知 Lys 的ε-氨基的pK’a 为10.5，问pH9.5 时，Lys 溶液中将有多少分数这种基团 给出质子（即[-NH3+]和[-NH2]各占多少）？ 3. 在强酸性阳离子交换柱上 Asp、His、Gly 和Leu 等几种氨基酸的洗脱顺序如何？为什么？ 4. Gly、His、Glu 和Lys 分别在pH1.9、6.0 和7.6 三种缓冲液中的电泳行为如何？电泳完 毕后它们的排序如何？ 5. 1.068g 的某种结晶α-氨基酸，其pK1’和pK2’值分别为2.4 和9.7，溶解于100ml 的 0.1mol/LNaOH 溶液中时，其pH 为10.4。计算该氨基酸的相对分子量，并提出可能的分 子式。 6. 求 0.1mol/L 谷氨酸溶液在等电点时三种主要离子的浓度各为多少? 7. 向 1L 1mol/L 的处于等电点的氨基酸溶液中加入0.3 molHCl，问所得溶液的pH 是多少？ 如果加入0.3molNaOH 以代替HCl 时，pH 又将如何？ 8. 现有一个六肽，根据下列条件，作出此六肽的氨基酸排列顺序。 （1） DNFB 反应，得到DNP-Val; （2） 肼解后，再用DNFB 反应，得到DNP-Phe; （3） 胰蛋白酶水解此六肽，得到三个片段，分别含有1 个、2 个和3 个氨基酸，后两 个片段呈坂口反应阳性。 （4） 溴化氢与此六肽反应，水解得到两个三肽，这两个三肽片断经DNFB 反应分别得 到DNP-Val 和DNP-Ala。 9. 有一九肽，经酸水解测定知由4 个氨基酸组成。用胰蛋白酶水解成为两个片段，其中一 个片断在280nm 有强的光吸收,并且对Pauly 反应、坂口反应都呈阳性；另一个片段用 CNBr 处理后释放一个氨基酸与茚三酮反应呈黄色。试写出这个肽的氨基酸排列顺序及其 化学结构式。 10. 一种纯的含钼蛋白质，用 1cm 的比色杯测定其消光系数ε0.1% 280。该蛋白质每毫升浓溶液 含有10.56ugMo。1：50 稀释该浓溶液后A280 为0.375，计算该蛋白质的最小相对分子量 （Mo 的相对原子质量为95.94）。 11. 1.0mg 某蛋白质样品进行氨基酸分析后得到58.1ug 的亮氨酸和36.2ug 的色氨酸计算该 蛋白质的最小相对分子质量。 12. 某一蛋白质分子具有α-螺旋及β-折叠两种构象，分子总长度为5.5×10-5cm，该蛋白质 相对分子质量为250000。试计算该蛋白质分子中α-螺旋及β-折叠两种构象各占多少？ （氨基酸残基平均相对分子质量以100 计算）。 解析： 1.（1）正确。（2）正确。（3）不正确，如N-末端测定中，有亚氨基酸，不宜用此法。（4） 错误，α-螺旋有右手和左手螺旋两种。（5）错误，不一定。 2.1/11，10/11。 3.洗脱顺序：Asp，Gly，Leu，His。在强酸性阳离子交换柱中，酸性氨基酸最先洗脱下来， 中性氨基酸次之，最后为碱性氨基酸，分子量小的优先于分子量大的氨基酸。 4.在pH1.9、6.0 和7.6 三种缓冲液中的电泳，其顺序均为：+Glu,Gly,His,Lys -。pH 1.9 时，四种氨基酸均带正电，电泳时向阴极移动；pH 6.0 时电泳，Gly 基本不动，His,Lys 带 正电，向阴极移动，Glu 带负电，向阳极移动；pH 7.6 时，His 基本不动，Glu,Gly 带负电， 向阳极移动，Lys 带正电，向阴极移动；同时考虑分子的大小因素。 5.相对分子量为89g/mol,可能为丙氨酸（Ala）。 6.计算过程略，三种离子的浓度分别为：[Ao]=0.084M.,[A+]=[A-]=7.84×10-3M。 7.加入0.3molHCl 后pH 变为2.71;用0.3molNaOH 以代替HCl 后pH 变为9.23。 8.六肽的氨基酸顺序为：（N）Val-Arg-Met-Ala-Arg-Phe。 9.氨基酸排列顺序为：（N）Pro-Met-Arg-Tyr。 10.根据A=KCL,已知相关数据代入得蛋白浓度C=1.25mg/mL,再利用蛋白质的最低相对分子 质量=Mo 的分子量×100/钼在该蛋白中的百分含量，计算得约11.3kD。 11.蛋白中Leu%=5.81%，Trp=3.62%；蛋白质中的Leu 残基%=5.01%，Trp 残基%=3.39%；蛋白 质最低分子量M=某氨基酸