神经碎片联合L对周围神经缺损修复的实验研究.pdfVIP

神经碎片联合LN对周围神经缺损修复的实验研究 研究生：石建民 专业：运动医学 导师：李秉胜 教授 中文摘要 目的 观察神经碎片联合层粘连蛋白诱导周围神经缺损修复的作用，为临床遇 到的周围神经缺损的病人找到一种切实方便可行的治疗方法。 材料与方法 1．聚乳酸聚羟基乙酸(PLGA)复合导管的制备 取一定量分子量约为10万的聚合物溶于氯仿中，配成10％的溶液，待 聚合物完全溶解后，加入一定量经研磨过筛的氯化钠，充分搅拌混匀后，浇 空干燥箱中真空干燥24小时，最后将材料置于去离子水中浸泡并不时搅动， 每4．6小时换一次水，连续48小时，取出后漓干水，真空干燥24小时。该 管由作者与济南岱罡科技生物有限公司联合制作。 2．动物实验 0只。盐酸氯胺酮腹腔麻醉后，于大鼠左股后 抓阉法随机分为3组，每组1 外侧作纵行切口，自肌间隙进入显露坐骨神经约2．5cm，在梨状肌下缘3ram 处切取长约6mm的坐骨神经干，任其自然回缩：A组神经碎片组：切取2mm 的神经片段，剪去神经外膜，将轴突在手术显微镜下剪碎，取适量填入PLGA 导管，在手术显微镜下8／0无创缝合线均匀缝合神经外膜和PLGA管壁，使 神经断端在PLGA管内相距10mm。B组神经片段+层粘连蛋白(LamininLN) 组：在A组的基础上，在PLGA管内注入0．1ml层粘连蛋白(1 0ug／m1)；C 对照组：将神经两断端剪断后8／0无创缝线原位缝合。缝合皮肤创口，术后 分笼饲养。 3．检测方法 3．1大体观察：术后定期观察伤口情况及大鼠步态变化、溃疡发生及愈 合时间及足部变化；观察左后肢肌肉萎缩程度，关节僵直屈伸及展趾反射情 况；术后8周和12周显露神经断端，观察实验组导管内再生神经情况；观 察PLGA导管与周围组织间的相容性与神经断端吻合情况，导管管壁有无塌 陷或扭曲断裂，远近端吻合口有无膨大及神经瘤形成，导管表面有无浅表血 供形成，与周围组织有无粘连。 3．2检测腓肠肌肌电图、小腿三头肌湿重、再生神经显微组织学切片以 为有统计学意义。 结果 1．大体观察：术后2周内各组大鼠实验侧足趾均呈并拢状不能着地行走， 并出现不同程度肿胀，无溃疡形成。术后2周大鼠伤口愈合好，缝线脱落。 术后8周，神经移植组和神经碎片+LN组试验侧足趾均可着地，腓肠肌出现 不同程度萎缩，展趾反射可引出；神经碎片组试验侧足趾仍未能着地，腓肠 肌萎缩明显，展趾反射未能引出。术后12周神经移植组和神经碎片+LN组 足趾出现拇趾外展，展趾反射较灵敏，腓肠肌出现不同程度恢复；神经碎片 组足趾可着地行走，无拇趾外展现象，腓肠肌萎缩较明显，展趾反射未引出。 术后8周可见PLGA导管与周围组织粘连疏松，易分离，表面少量毛细血管 形成，剖开导管神经碎片组和神经碎片+LN组PLGA管内均有再生神经通过， 自体神经移植组可见移植段神经与周围组织轻度粘连，远近端吻合口均无膨 大，神经外观接近正常。术后12周PLGA导管已基本降解完毕，神经外膜形 成完整，剖开外膜可见神经碎片组内神经纤维较神经碎片+LN组内再生神经 直径略细，神经碎片+LN组再生神经排列较规则，无明显增生的纤维组织。 自体神经移植组可见移植段神经外观接近正常，远近吻合口无膨大，吻合口 与周围组织无粘连，无神经纤维溢出，移植段神经活动度正常。 2．检测结果：通过检测8周和12周时腓肠肌肌电图、小腿三头肌湿重、 再生神经纤维组织学切片并进行图像分析，结果采用SPSSl3．0进行数据处 理，行单因素方差分析，分析结果示：神经碎片+LN组神经恢复功能优于 神经碎片组P0．05，自体神经移植组显著优于神经碎片组P0．05，而与神 经碎片+LN组无显著统计学意义P0．05。 Z 结论 (1)实验证实PLGA导管具有良好的生物相容性，，生物降解率适当， 是一种良好的周围神经组织工程材料。 (2)神经碎片能够作为桥接神经导管内的填充物促进周围神经的缺损 修复。 (3)证实神经碎片+LN组神经恢复效果能够接近