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猪伪狂犬病免疫体金鉴别诊断试剂盒的研制
摘要
伪狂犬病(Pseudorabies,PR)又叫奥叶兹基氐瘸(Aujeszkys
犬瘸痪毒(Pseudorabies 1)氍;}起瓣
多种浆畜、野生动物、伴侣动物霸实验动物静一静急性传染病。在自然条辞下,奉病最常觅
于猪、牛、羊、犬、猫和鼠类。临床上多以发热、骚痒(猪除外)和急性脑脊髓炎为主要症状。
猪和鼠是此病的主鬻自然宿主和传染源。该病具裔高度的传染性,一且在猪群中出现,将很
快遥道空气或接触传染绘其它猪只拳l猪场。近年表瓣磺究表爨铸骧犬病病毒还糍逶过乳汁秘
生殪滗撼染。特鬟是在瓶模证、繁约纯、现代诧的蕊密度葬猪地逸,伪狂犬藏瘸毒可在猪群
间不断传播,危害尤为严重,除引起死亡和繁殖障碍外,该病述严重影响猪只的生长发育和
生产性能,它不仅给养猪业造成了瓯大的经济损失(在美国每年仪猪伪狂犬病造成的损失就
达数露万美元),丽鼠它鲍存在使整个养殖业时刻掰临着严重的威胁。PRV归属予口疱疹病
毒囊褥。嚣蔫藿赛上龟括我国在痰广‘泛使蠲熬臻貉诧瘸瓣疫萤麓带客蜉基困绞失静表鍪特
征。
本实验根据PRVMin-A株gE基因序列,参考融发表的关于PRVgE蛋白抗原性表位的相
关搬邋。利用PCR方法扩增了PRVgE基因不禽馈譬肢和跨膜区的部分,并克隆到原核表达
缝像爱俸为撬蒙。
本试验依据目前因}勾所应用的伪狂犬疫苗均魁gE基因缺失的表型特征。箍搿毒感染的
PRV都禽有gE基因遮~事实,建立了一种快速、简易的分子鉴别诊断方法——浆别胶体金免
动物。零』角蒙棱表达方法蔫《器镑狂炎龉蛋叁獍艨,爆全瘫毒撬溅篷羧胶俸金。莜次将猪傍
狂犬糖猴船性血清、龋蛋自抗原和伪狂犬全病毒抗原标记在硝酸纤维素(Nc)膜上制各成免
疫胶体金检测板。检测时血清中PRV抗体与金标抗原结合,沿着Nc膜层析移动。与NC膜上
相应的配体结合厉形成肉眼可见的紫红色斑点。缀特异性交叉试骚、阻断试验验证该方法特
异经、灵敏度较离,剃耀嗡善研镑狂犬疫萑生产缀罐供起猪PRV瘫兔盘溥进行爱敏度测试。
荠雳阀搂ELISA法徽嗣步对照,结柒表孵其灵敏瘦旗低予闻搂ELISA法。诧方法快速、箍便、
结果准确,可用于监测猪血清中的PRV抗体,具有适用价值。
关键词伪狂犬病毒:鬣白基因:gE基因:鉴别诊断;胶体金免疫层析法
V
of
Researchofdifferentiate
immune-gold
Virus
FiltrationforPorcinePseudorabies
assay
Abstract
named
Pseudorabias(alsoAujeszkysdisease,AD),causedbypseudorabies
akindofacuteinfectiousdiseasecharacterized disorderor failure
byneurological reproductive
like and
invariouswild animalsandlivestock
animals,experimental just pigletspregnantpigs.
diseaseis
Innatural isoftenseenin andrat.The
condition,it pig、cattle、sheep、canine、cat
willinfe
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