胃肠道癌患者外血微转移检测及其临床意义研究.pdfVIP

加歹，z掌_《霪止堕塑型塑丝苎———————一 胃肠道癌患者外周血微转移检测 及其临床意义研究 浙江大学医学院 肿瘤学 硕士研究生 方雏佳 导 师 刘剑副主任医师 中文摘要 消化道肿瘤约占恶性肿瘤的60～70％。胃肠道癌占消化道恶性肿瘤的绝大 部分，是常见的恶性肿瘤。转移，特别是血行转移，是恶性肿瘤最特征的生物 行为，也是胃肠道癌患者死亡的最主要原因。常规临床检查发现转移灶的患者 多已较晚，治疗效果差。检测胃肠道癌患者外周血中微转移，对于早期发现和 诊断肿瘤转移，判断预后和指导治疗，提高防治效果有重要的意义。 本研究应用巢式逆转录聚合酶链式反应(RT—PcR)方法检测细胞角蛋白 CK20mRNA的表达，负性免疫磁珠分离(immunomagnetic Icc)的方法检测BerEP4的表达等方法检测临床常规检查无转移的胃肠道癌患 者手术前外周血中的微转移的情况，对比分析其检测结果及检测结果与手术后 临床病理分期的关系，研究这些方法检测外周血微转移的价值和意义，为临床 提供可靠的检测外周血微转移和监测与早期发现转移的方法。 加歹，幺掌_(亳坦堕塑查塑型生——————一 材料与方法 分别任意选取2004年3月至8月问32例手术前临床检查无转移的胃肠道癌患 者，12例胃肠道良性疾病患者和13例体检健康者，为巢式R—PCR法检测外周血 月至2005年3月问15例手术前临床检查无转移的胃肠道癌患者，为ICC法检测外 别分析检查结果及检铡结果与手术后病理分期的相关性，对比分析常规未用负 CK20mRNA的表达阳性率及其与手术后病理分期的相关性。 结 果 率分别为28％、34％和50％，而良性胃肠道疾病和健康人表达均为阴性， CKl 阳性者的手术后为III～tV期患者比例分别为78％(7／9)、82％(9／I 1)与75％(12／16)， 2 但无统计学差异。2．负性IMS吸附效率为71～82％(除去外周血中血细胞比例)。 表达阴性者的III～IV期患者比例41％(7／1 高于相应的I～lI期患者的阳性率20％(1／5)。 结 论 CK20mRNA的表达都可作为检测胃肠道癌外周血微转移方法，其中联合检测 细胞，实现对肿瘤细胞的高效富集，提高阳性检出率。负性IMS结合巢式RT-PCR 3 胁歹，z擎_《毫扯堕塑型塑塑苎一一 ． 作为检测胃肠道癌外周血微转移方法，具有更好的价值和意义。3．负性IMS结合 ICC法检测BerEp4表达可能是一种可靠的胃肠道癌外周血微转移检测的新方法， 值得进一步研究。 【关键词】负性免疫磁珠分离巢式逆转录聚合酶链式反应胃肠道癌外周血细胞角蛋 白免疫细胞化学微转移 缩写： IMS(immunomagnetic chain transcription-polymerasereaction)：逆转录聚合酶链式反应 19)：细胞角蛋白19 ICC CK20(Cytokeratin20)：细胞角蛋白20 (immunocytochemistry)：免疫细胞化学 4 加夕，z鲈一@沁坚塑查塑垡生———————一 in bloodof ofmicrometastase