脂肪水平和脂肪组成对大菱鲆幼鱼脂沉积的影响.pdf

谨以此论文献给导师、我的家人和培养我的中国海洋大 学动物营养与饲料实验室！ 彭 墨 万方数据 万方数据 万方数据 脂肪水平和脂肪酸组成对大菱鲆幼鱼脂沉积的影响 摘 要 以我国重要的冷水性经济养殖鱼类大菱鲆（Scophthalmus maximus L. ）为研 究对象，在室内循环养殖水系统进行摄食生长实验，以探究饲料中脂肪水平和脂 肪酸组成对大菱鲆生长、脂肪酸组成、脂肪沉积及其相关基因表达的影响，在此 基础上探讨大菱鲆摄食高脂或高植物油水平饲料后肝脏脂肪过多沉积的分子机 制。本文的研究内容和主要研究结果如下： 1 大菱鲆脂蛋白脂酶、过氧化物酶体增殖物激活受体 α和微粒体甘油三酯转移 蛋白的克隆、表征分析和组织差异性表达 通过同源克隆和 RACE 技术从大菱鲆中获得脂蛋白脂酶（LPL ）、过氧化物 酶体增殖物激活受体 α （PPARα）和微粒体甘油三酯转移蛋白（MTP ）的cDNA 全长。大菱鲆 LPL 全长共计 2074bp ，其中 5′-非编码区、3′-非编码区和开放阅读 框（ORF ）分别为 152bp、377bp 和 1545bp，编码 514 个氨基酸。LPL 具有 1 个 跨膜区域。通过氨基酸序列比对发现，大菱鲆 LPL 与其它已知鱼纲脊椎动物该 基因序列具有高度同源性。组织差异性表达结果显示，大菱鲆 LPL 在肌肉中表 达量最高，其次是肝脏和肾脏，而在鳃、脑、脾脏、心脏、肾脏、精巢、小肠和 幽门盲囊中表达量较低（P0.01 ）。大菱鲆 PPARα全长共计 2992bp ，其中 5′-非 编码区、3′-非编码区和 ORF 分别为 397bp、1170bp 和 1425bp, 共编码 474aa 。大 菱鲆 PPARα具有 1 个跨膜区域，与其它已知鱼纲脊椎动物该基因序列具有高度 同源性。PPARα 在肝脏中表达量最高，其次是在肌肉、心脏、肾脏和脑，而在 鳃、幽门盲囊、精巢、小肠和脾脏中表达量较低（P0.01 ）。大菱鲆MTP 全长共 计 3309bp，其中 5′-非编码区、3′-非编码区和 ORF 分别为 91bp、551bp 和 2667bp ， 编码 888 个氨基酸。通过氨基酸序列比对发现，大菱鲆 MTP 与其它已知鱼纲脊 椎动物该基因序列具有高度同源性。MTP 在大菱鲆幽门盲囊中表达量最高，其 次是肌肉、小肠、肝脏和肾脏，而在脑、鳃、精巢、心脏和脾脏中表达量较低 （P0.01 ）。 I 万方数据 2 饲料脂肪水平对大菱鲆幼鱼生长、血浆生化指标、脂肪酸组成、脂肪沉积及 相关基因表达的影响 大菱鲆已养殖多年，但有关大菱鲆饲料最适脂肪水平研究并未见报。故以鱼 油/豆油（1:1）为主要脂肪源，配制脂肪含量为3.41%、8.01%、11.87%、15.73%、 19.34%和 22.68% 的 6 种等氮（粗蛋白为 51% ）等无氮溢出物（13.05%）饲料以 探究饲料脂肪水平对大菱鲆（初始体重为 9.49 ±0.03g ）生长、脂肪酸组成，血 浆生化指标、脂肪沉积及相关基因表达的影响。每组饲料随机投喂三组实验鱼， 饱食投喂，养殖周期为 12 周。实验结果表明，大菱鲆存活率（SR）随饲料脂肪 水平的升高先显著升高后趋于平稳。饲料脂肪水平≤8.01% （L3.41 组和 L8.01 组）组大菱鲆 SR 显著低于脂肪水平≥11.87%组（L11.87 组、L15.73 组、L19.34 组和 L22.68 组）（P0.05 ）。随饲料脂肪水平升高，大菱鲆幼鱼增重