第二章基因表达与调控.pptVIP

举例: p53 p53： 抑癌基因，蛋白质分子质量为53KD，命名为p53 转录因子，参与调节细胞周期、细胞凋亡、维持基因组稳定性等 p53基因定位 p53基因定位： p53基因结构 p53蛋白 p53功能 p53的调节 p53突变与肿瘤发生 p53与肿瘤治疗 第 一 节基本概念与原理 基因的激活 转录 转录后加工 翻译 翻译后加工修饰 化疗药物阿霉素诱导POLH和XPO5基因的表达谱 基因表达的空间特异性 GAPDH在各组织细胞中的表达 （二）转录调节蛋白 （1） 基本转录因子 是指能够在启动子部位与核心序列TATA盒和RNA聚合酶Ⅱ结合，形成转录前起始复合物（PIC）的一类调节蛋白，以起动转录。 与RNA聚合酶Ⅱ结合的(基本)转录因子有：TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，TFⅡE，TFⅡF，TFⅡH, TFⅡJ 等。 首先由TFⅡD与启动子TATA盒结合，然后按一定的时空顺序依次结合RNA PolⅡ和其它转录因子，形成PIC。 最常见的DNA结合域 第三节原核基因表达调节 调节机制相对简单 多级调控，但主要在转录水平 多基因作为一个单元被调控 负性调节比较常见 乳糖操纵子的结构 乳糖操纵子的调节机制 乳糖类似物： 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（简称IPTG） 被用来作为乳糖操纵子的诱导物； IPTG与阻褐基因结合并使之不活跃，但却非β-半乳糖苷酶的基底，不能被大肠肝菌所代谢； IPTG能在缺乏lacY基因下而有效地被运送。并且，由于细胞不会代谢IPTG，它的浓度在实验中并不会改变。 乳糖操纵子应用： 第四节 真核基因表达调节 真核基因表达调控特点 例如：eIF-2α发生磷酸化 小 结 谢谢大家！ 当调控蛋白结合于特异DNA序列后促进基因的转录，这种基因表达调控的方式称为正调控。 E.coli中的一些弱启动子，本身结合RNA聚合酶的作用很弱，对于这些启动子来说，正调控作用是很重要的。 2、CAP的正性调节 CAP蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递给许多操纵子，使细菌在缺乏葡萄糖的环境中可以利用其他碳源。 CAP结合DNA由cAMP控制。 CAP蛋白（分解代谢物基因活化蛋白 catabolite gene activator protein）： + + + + 转录 无葡萄糖，cAMP浓度高时 有葡萄糖，cAMP浓度低时 Z Y A O P DNA CAP CAP CAP CAP CAP CAP 葡萄糖 cAMP cAMP cAMP— CAP CAP DNA 乳糖代谢 操纵子 cAMP CAP 转录 CAP—DNA 3、协调调节 当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用。 如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。 单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏。 mRNA 低半乳糖时 高半乳糖时 葡萄糖低 cAMP浓度高 葡萄糖高cAMP浓度低 RNA-pol O O O O CAP CAP结合位点 启动子 操纵基因 结构基因 + 葡萄糖 + 乳糖 + 葡萄糖 - 乳糖 - 葡萄糖 - 乳糖 - 葡萄糖 + 乳糖 开放 关闭 关闭 关闭 转录 mRNA 阻遏物 RNA聚合酶 乳糖操纵子中的P是一个弱启动子。 半乳糖苷 通透酶 硫半乳糖苷 乙酰基转移酶 cAMP CAP-cAMP --葡萄糖 +乳糖 --乳糖 IPTG 乳糖 重点： 熟悉真核基因表达调控的特点； 了解真核生物的基因表达调控的基本规律。 一、真核基因组具有独特的结构特点 （一）真核基因组结构庞大 哺乳类动物基因组DNA 约 3×109碱基对。 人编码基因约2万个，编码序列仅占总长的1%。 重复基因约占5%~10%。 （二）真核基因转录产物为单顺反子 单顺反子：即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。 （三）真核基因组含有大量的重复序列 单拷贝序列（一次或数次） 高度重复序列（106 次） 中度重复序列（103 ~ 104次） 多拷贝序列 真核结构基因两侧存在有不被转录的非编码序列，往往是基因表达的调控区。在编码基因内部尚有内含子（intron）、外显子（exon）之分，因此真核基因是不连续的。 （四）真核基因中存在非编码序列和间隔区， 故：具有不连续性 二、真核基因表达调控特点 （一）真核细胞内含有多种RNA聚合酶 真核RNA聚合酶有三种，即RNA pol I、II及 III。 核仁 rRNA（18S，28S，5.8S）