第二章克隆技术(植物克隆).pptVIP

1： 克隆技术包含的三个层次及原理 4:理清概念之间的关系 细胞的全能性 单个细胞的全能性 如果单个细胞不能发育成一个完整的个体，需要N个细胞共同作用才能发育成一个完整的个体，那么每个细胞的功能就是一个个体发育过程中的一部分，不能称之为细胞的全能性。 种子是有性生殖，是两个单倍体细胞（它的染色体是完整细胞的一半）的共同作用，所以不能体现细胞的全能性。 为什么植物用种子进行繁殖不能体现细胞的全能性？ 全能性要求的是已分化的细胞变成完整个体，种子中有多个细胞，所以不能体现全能性，而且种子本身就能发育成一个个体，所以更不能体现全能性。 植物组织培养 植物组织培养 接种用具 植物组织培养 植物组织培养 植物组织培养 植物组织培养 植物组织培养 判断：同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同。生殖细胞、体细胞 2．下图表示应用植物组织培养技术培育优质玉米 的过程。对此过程的相关描述错误的是 A．B→E过程中细胞全能性的高低发生了改变 B．C试管中形成的是高度液泡化的薄壁细胞 C．A植株和F植株体细胞中的染色体组数相同 D．培养出的F植株一般不能直接应用于扩大种植 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交 讨论 3:“分析操作流程”理解细胞工程 一、植物组织培养 注意 组培技术操作中的一些具体技术细节，例如灭菌，激素的应用等等。 注意细胞分化知识的复习。 注意组培技术在育种中的应用。 4:理清概念之间的关系 4:理清概念之间的关系 4:理清概念之间的关系 植物组织培养 2、应用： 再分化 脱分化 愈伤组织 离体器官组织细胞 植物体 （1） 利用突变体育种 植物组织培养过程中,细胞一直处于分生状态,容易受环境(如射线 化学物质等)的影响而产生突变(如抗病毒 抗盐碱 等), 人们可以筛选有用的突变体得到所需新品种 植物组织培养 2、应用： 提取 代谢产物 生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。如从紫草愈伤组织中提取紫草素 脱分化 愈伤组织 （5）离体器官组织细胞 用愈伤组织生产细胞代谢产物 生产紫衫醇-----植物组织培养 人参细胞生产 人参皂甙 植物组织培养 2、应用小结： (1)快速繁殖、培育无病毒植株、转基因植物培育 (2)制作人工种子 (3)单倍体育种 (4)利用突变体育种 (5)用愈伤组织生产细胞代谢产物 20世纪60年代，一些科学家提出一个设想：让番茄与马铃薯杂交，培育出地上结番茄，地下结马铃薯块茎的植物。 植物体细胞杂交 如果要实现这一设想，你认为可以采用哪些方法？ 就是将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培养成新的植物体的技术. 植物体细胞杂交 来自不同植物的体细胞融合在一起，遇到的第一个障碍是什么？ 植物细胞 细胞壁细胞膜细胞质细胞核 原生质体 植物细胞壁：纤维素、果胶 纤维素酶 果胶酶 酶解法 1、过程： ⑴酶解法去除细胞壁，获得有活力的原生质体。 ⑵诱导原生质体融合 诱导原生质体融合的方法 物理方法：离心、振动、电刺激 化学方法：聚乙二醇（PEG） 利用电激法将野生马铃薯与栽培马铃薯进行细胞融合的显微照片 诱导原生质体融合的方法 物理法：离心、振动、 电刺激 化学法：聚乙二醇,结合高Ca2+ 高pH (加拿大高国 楠首创) 化学融合的机制： 高pH—高Ca2+法诱导原生质体融合的基本原理是中和原生质体表面所带的电荷，使原生质体的质膜紧密接触，从而有利于质膜的接触融合。 物理融合的机制：常用方法为电融合法。此法是先将两种原生质体以适当的比例混合成悬浮液，将其滴入电融合小室中，给小室两极以交变电流，使原生质体沿电场方向排列成串珠状，接着给以瞬间高强度的电脉冲，使原生质体膜产生局部破损而导致融合。 利用电激法将野生马铃薯与栽培马铃薯进行细胞融合的显微照片 两两融合的细胞有几种情况？ 杂种细胞需要筛选 筛选杂种细胞 杂种细胞的筛选方法有：①细胞系互补的选择方法，包括叶绿素缺失互补、营养缺陷互补和抗性互补等；②利用物理特异性差异的选择方法：包括原生质体的大小、颜色、浮密度等的不同来选择；③利用生长特异性差异的选择方法。对再生植株的杂种性状进行鉴定。 植物体细胞杂交 1、过程： ⑴酶解法去除细胞壁，获得有活力的原生质体。 ⑵诱导原生质体融合 ⑶筛选杂种细胞 ⑷利用植物组织培养技术获得杂种植株。 脱分化 再分化 克服远缘杂交不亲和的障碍 2、意义: 杂种植株可育， 利用此方法培育新作物的过程不遵循孟德尔的遗传定律，因为不属于有性生殖