现代分子生物学教案.ppt

根据母链甲基化原则进行错配修复过程示意图 甲基化指导的错配修复示意图 第二章 染色体和DNA DNA转座重组 1) 原核生物转座子的分类与结构特征 根据转座子结构的不同，可以分为两大类型： 插入序列 （IS因子） 分类 带有IS序列 复合型转座子 不带有IS序列 第二章 染色体和DNA 四. DNA的重组 DNA的重组 (DNA recombination) 一个生物个体基因组获得了外来DNA片段，称为DNA重组。人为的DNA重组属于基因工程范筹. 根据重组中对DNA序列和所需蛋白质因子的要求把重组分为四类：同源性重组、位点特异性重组、转座重组和异常重组。 第二章 染色体和DNA DNA的同源重组 DNA的同源重组 (Homologous recombination ) 同源性重组是指发生在同源DNA序列相同区域之间的重组。 同源染色体上相同区域之间的重组。 第二章 染色体和DNA DNA的同源重组 同源性重组的基本条件 交换区具有相同或相似的序列 DNA分子中不同部位间的重组有时也会发生, 这种重组称为异位重组。 异位重组会导致DNA序列的缺失、复制、倒位等现象。 第二章 染色体和DNA DNA的同源重组 双链DNA分子之间互补碱基进行配对 两个DNA分子的链之间互补的碱基配对能确保重组只发生在同样的基因座之间, 也就是DNA分子的相同的部位。 两个双链DNA分子通过链之间互补的碱基配对被维系在一起 称为联会. 同源性重组涉及到联会的形成。 第二章 染色体和DNA DNA的同源重组 重组酶 同源性重组: 两条DNA双螺旋分子间断裂 修复 连接 重组体的释放 异源双链区的形成 同源性重组时, 在两个DNA分子之间互补碱基配对的区域 称为异源双链区。 第二章 染色体和DNA DNA的同源重组 Holliday 双链侵入模型 同源重组过程涉及两个DNA分子间同源区域的交换。 在大肠杆菌中，当二个同源DNA双螺旋排列在一起时， - 在一对姐妹染色单体上产生切口, - 含有5’端切口的单链DNA形成RecA-ssDNA细丝, - 这些细丝相互交换并寻找相对的DNA双螺旋上的相应序列 (侵入), - 切口被封好并形成四分支的Holliday结构 (这个结构是动态的), - 交叉点左右任何两个方面移动相当一段距离 (分支迁移)，这个Holliday中间体能以两种方式中的一种拆分为两个DNA双螺旋。 分支迁移 Holliday中间体 第二章 染色体和DNA DNA的同源重组 第二章 染色体和DNA DNA的同源重组 第二章 染色体和DNA DNA的同源重组 RecBCD 核酸酶从一端靠近Chi 位点， 在移动中降解DNA。在Chi 位点它行使内切酶 活性切断单链，然后丢掉RecD，只保留解旋酶 活性。 只要在入侵单链和双链之间有自由的末端，RecA蛋白就能促进单链的同化。 第二章 染色体和DNA