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多以最新基因工程研究成果为载体考查基因工程的工具与操作程序及应用。 例题 (2014·山东,36)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下: (1)htPA基因与载体用________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用________技术。 (2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其________。采集的精子需要经过________,才具备受精能力。 (3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的________。 (4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到________,说明目的基因成功表达。 [立意与点拨] 知识:考查基因工程的基本操作程序、细胞工程、动物细胞培养等知识。能力:考查考生对基础知识的理解与应用能力。 点拨:正确理解基因工程、胚胎工程及细胞移植技术的基础知识。 [解析] (1)用同种限制酶切割质粒和含有htPA基因的DNA片段可产生相同的黏性末端,便于构建基因表达载体;通常采用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否已插入受体细胞DNA。 (2)为获得更多的卵母细胞,通常对供体母羊注射促性腺激素使其进行超数排卵;采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。 (3)通常用显微注射法将重组表达载体导入动物的受精卵;为了获得母羊,移植前需要对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定;早期胚胎细胞具有全能性,可利用胚胎分割和胚胎移植技术获得多个转基因个体。 (4)htPA基因的表达产物为人组织纤溶酶原激活物,若在转基因母羊的羊乳中检测到人组织纤溶酶原激活物,说明目的基因成功表达。 [答案] (1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶) DNA分子杂交(或核酸探针) (2)超数排卵 获能(处理) (3)显微注射法 性别鉴定 全能性 (4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物) 易错点:基因工程的应用掌握不够牢 (2015·天津质检)北极比目鱼中有抗冻基因,下图是培养转基因抗冻番茄植株的过程示意图,有关叙述正确的是( ) A.过程①和过程②所用的酶相同 B.转基因抗冻番茄植株的获得是定向变异的结果 C.应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达 D.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行筛选 [易错分析] 过程①包括逆转录形成DNA单链和以DNA单链为模板合成与模板互补的另一条单链,因此,这一过程需要逆转录酶和DNA聚合酶,而过程②是使用限制酶和DNA连接酶形成重组质粒,不知道上述知识会导致误选A项。不知道将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法,是导致误选D项的原因。 [答案] B [解析] 过程①中用到逆转录酶和DNA聚合酶,过程②中用到限制酶和DNA连接酶;应用DNA探针技术只能检测受体细胞中是否有目的基因,不能检测目的基因是否表达;将重组质粒转入农杆菌的目的是利用农杆菌将目的基因转入受体细胞。 [误区警示] 将目的基因导入受体细胞的方法 ①植物细胞:常用农杆菌转化法(双子叶植物和裸子植物常用)、基因枪法(单子叶植物常用,成功率高,成本高)、花粉管通道法(我国科学家独创,简便经济)。 ②动物细胞:常用显微注射技术。 ③微生物细胞:Ca2+处理法。 * * 走向高考 · 生物 路漫漫其修远兮 吾将上下而求索 高考二轮总复习 第一部分 微专题强化练 专题十一 现代科学技术专题 第一部分 (一)基因工程 考 向 分 析 考 题 引 路 强 化 训 练 2 3 1 易 错 防 范 4 考 向 分 析 考 题 引 路 强 化 训 练 (点此链接) 易 错 防 范 *
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