嗅觉记忆相关蛋白的蛋白质组学的研究.pdfVIP

V01．31 高等学校化学学报 No．8 2010年8月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSmES 1535一1540 嗅觉记忆相关蛋白的蛋白质组学研究 郑君芳1，华琳2，张秋霞3，李德龙1，贺俊崎1 (1．首都医科大学生物化学与分子生物学系，2．生物信息学系，3．中医系，北京100069) 摘要应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定和数据库检索，分析比较了C57BL／6J小鼠在嗅觉训练和记忆测试后 嗅球蛋白表达的差异，探讨了与嗅觉记忆相关的蛋白质．C57BL／6J小鼠经嗅觉训练后，可对相应的气味保 持记忆能力，其嗅球蛋白表达存在明显差异，5种蛋白与嗅觉记忆形成显著相关．上述蛋白功能涉及神经发 育、信号转导及细胞骨架和核苷酸代谢，其中神经发育和信号转导相关蛋白表达上调，而细胞骨架和核苷酸 代谢相关蛋白表达水平降低．这些与嗅觉记忆形成相关的蛋白深化了对嗅觉记忆机制的认识，为研究和治 疗认知相关疾病提供了新靶标． 关键词嗅觉记忆；嗅球蛋白；蛋白质组学；质谱 中图分类号0629；Q51 文献标识码A 文章编号0251-0790(2010)08-1535-06 学习记忆是人类基本的认知功能，是人类智力、创造性乃至个性形成的神经学基础．嗅觉线索的 记忆对于啮齿类动物在生活环境中的生存极为莺要，如野外小鼠主要依靠嗅觉来寻找食物…．而对于 哺乳动物，嗅觉识别记忆在亲缘识别、配偶选择、幼仔抚育、近亲回避、等级制度的建立和取食等行为 上发挥着关键作用怛j．嗅觉疗法还可用于治疗因大脑外伤所引起的失忆．由于记忆依赖于蛋白质的合 成[3]，因此对于嗅觉记忆相关蛋白的研究有助于理解嗅觉记忆的形成机制以及嗅觉疗法的进一步发展 和应用．当前对嗅觉记忆的行为模型及在小鼠品系中的嗅觉记忆进行行为学研究的报道较多，但对嗅 觉记忆相关蛋白的系统研究则较为缺乏． 本研究选取记忆研究常用的标准小鼠品系C57BL／6J，并选用最简单易行的嗅觉记忆行为学方 法…，即用奖赏刺激小鼠来进行辨别气味的训练，进而测试小鼠在训练气味小室中挖掘及寻找奖赏糖 片的时间．经过这些气味辨别记忆实验后，把小鼠的嗅球．嗅觉记忆产生的主要位点Hjl用蛋白质组学 方法进行研究，以探讨小鼠嗅球蛋白表达与嗅觉记忆形成的关系． 1材料与方法 1．1材 料 1．1．1 实验动物C57BL／6J小鼠由维也纳医科大学动物中心提供．选用鼠龄10～14周的雄性小鼠， 分笼饲养，自由饮用饲料和水，动物室昼夜交替自然采光． 0．05 toni的Whatmanl号滤纸上，再将滤纸置于含有10—12个小孔的气味 mL的气味剂置于直径55 cm)中．所有的气味罐用垫料覆盖，在每个气昧罐的培养皿上放几粒糖粒以 罐(高1．5cm，直径6．25 增强效果． 1．1．3糖粒用刀片将糖块切成直径大约为lmill的碎片作为奖励． 1．1．4 cm×19cm×13 嗅觉记忆训练和测试装置训练装置…为透明聚乙烯笼(30 cm)，其底层覆盖 1 收稿日期：2009．12-09． 准号：2007JIA．2，2007JL50，10J126)资助． he@cg!．mu．edu．cn 联系人简介：贺俊崎，男，博士．教授，博士生导师，主要从事细胞信号转导与蛋白质组学研究．E-mail：jq 万方数据 高等学校化学学报 V01．3l cmx20cm×20 am)中间由两道3 2／3处，气味辨别测试装置盒(69 am厚的透明丙烯酸隔板分成3个 cm×20cm×20