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花生抗黄曲霉的植物双价表达载体的构建-中国农学通报
中国农学通报 2014,30(6): 124-128
Chinese Agricultural Science Bulletin
花生抗黄曲霉的植物双价表达载体的构建
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肖 宇 ，陈湘瑜 ，陈 华 ，陈剑洪 ，庄伟建
1
（福建省泉州市农业科学研究所，福建泉州362212 ；
2 福建省福建农林大学油料所/福建省作物分子与细胞生物学重点实验室，福州362212）
摘 要：通过常规育种培育的抗黄曲霉品种皆表现抗性不稳定，鉴此开展通过基因工程手段以培育高抗
以及无筛选标记的转基因花生品种。几丁质酶基因CHI 和葡聚糖酶基因GLU 皆为广谱性的抗病基因
且具有协同增效作用。分别以pSC 1300-8-CHI 和pSC 1300-13-GLU 载体为基础，通过PCR 技术在CHI
基因的特异启动子8#前端和T-nos 末端分别加入Nco Ⅰ酶切位点和Afl Ⅱ酶切位点，在GLU 基因的特异
启动子13#前端和T-nos 末端分别加入Ap a Ⅰ酶切位点和Sp e Ⅰ酶切位点，通过酶切、连接将上述2 个基
因连接在抗生素自我删除载体pLoxp 上，获得了具有抗生素自我删除选择标记的双价果种皮特异表达
载体pLoxp-8-CHI-13-GLU 。经过限制性内切酶鉴定，该植物表达载体构建成功。
关键词：果种皮特异启动子；抗黄曲霉；表达载体；抗生素自我删除
中图分类号：S565.203.3 文献标志码：A 论文编号：2013-1485
Construction of Plant Bivalent Expression Vectors Against Aflatoxin in Peanut
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Xiao Yu , Chen Xiangyu , Chen Hua , Chen Jianhong , Zhuang Weijian
1
( QuanzhouInstituteofAgriculturalSciences, Quanzhou Fujian 362212;
2FujianKeyLabofPlantMolecularandCellBiology,FujianAgricultureandForestryUniversity, Fuzhou 350002)
Abstract: The performance of species resistance to Aspergillus by conventional breeding are unstable,
therefore, genetic engineering is used to breed varieties resistant to Aspergillus. CHI and GLU are
broad-spectrum resistance genes and have synergistic effect. Based on constructed vectors pSC 1300-8-CHI
and pSC 1300-13-GLU, Nco Ⅰrestriction site was added to the front of the promotor 8# of CHI gene and Afl Ⅱ
restriction site was added to the end of T-no
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