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第五章 现代食品安全检测技术 第一节 高效液相色谱法测定蜂蜜中残留的四环素 一、实验目的 掌握高效液相色谱法测定蜂蜜中残留的四环素的原理 熟悉高效液相色谱法测定蜂蜜中残留的四环素的实验方法 了解高效液相色谱仪的基本结构与使用方法 二、实验原理 （一）四环素是一种广谱抗菌素，可用于治疗和预防一些动物性疾病，但如果长期使用，将导致四环素类药物在动物类组织中的残留。残留在动物类组织中的四环素类药物会影响食用者的健康。四环素类药物的毒性反应主要表现为对胃、肠、肝脏的损害及牙齿的染色等，还会造成过敏反应、二重感染、致畸胎作用。因此应严格控制其在食品中的残留量。 （二）用酸性的Na2 EDTA-Mcllvaine缓冲溶液将蜂蜜中蛋白质沉淀 ,同时将四环素提取出来，以草酸与乙腈为流动相，C18柱作为色谱柱，反相分离，紫外检测器检测，在四环素的标准曲线的线性范围内，依据其测得的峰面积与其含量间的线性关系进行定量分析。 三、仪器和试剂 （一）仪器 1. 高效液相色谱仪 2．紫外检测器 3．涡旋混合器 4．离心机 5．天平 （二）试剂 1．甲醇 2．乙腈 3．乙酸乙酯 4．磷酸二氢钠 5．盐酸 6．柠檬酸 7．乙二胺四乙酸二钠 8．草酸 四、操作步骤 1．提取 （1）称取5g试样，置于50mL离心管中，加入30mL0.1mol/L Na2E