发酵工程工艺设计分析.docVIP

发酵工程设计说明 年产1吨工业纤维素酶发酵工艺设计 设 计 人：张鹏辉 设计部门：发酵研发部 部门主管： 2011年 06月20日 前言 1 1纤维素酶简介 1 1.1纤维素酶的分类 1 1.2纤维素酶的作用机理 2 1.3纤维素酶的分子量、分子结构及等电点 3 1.4产纤维素酶的主要微生物类群 4 2产纤维素酶的菌种选育 5 2.1 里氏木霉的特性 5 2.2培养基 5 2.3 菌种 6 2.4酶活力测定 6 2.3菌种筛选与鉴定 6 2.4诱变处理 7 2.5菌种保藏 8 3培养基的优化 9 3.1产酶培养基 9 3.2摇瓶种子培养 9 3.3产酶发酵培养 9 3.4生长曲线的绘制 9 3.5纤维素酶活力测定 9 3.6培养基的优化方法 10 4培养基的灭菌 15 4.1微生物的热死灭动力学方程 15 4.2温度对K的影响 15 4.3湿热灭菌 18 5种子扩大培养 20 5.1种子制备 20 5.2车间种子制备 20 5.3 发酵过程 21 6发酵设备选取及物料衡算： 23 6.1发酵罐的工艺尺寸 23 6.2物料横算 24 7下游加工 25 7.1分子筛层析 25 7.2离子交换层析 25 7.3 酶活力测定 25 7.4浓缩 27 7.5低温结晶 27 7.6分离、洗涤 27 7.7干燥磨粉 27 参 考 文 献 28 前言资源和环境问题是2l世纪人类面临的最主要挑战，纤维素与木质素、半纤维素及其它多糖一起构成植物细胞壁的主要成分，是生物圈最丰富的可再生资源和能源物资，是地球生物圈碳素和能量循环的主要部分。据估计，植物每年大约合成1000亿吨以上的纤维素中国的天然纤维素。原料也很丰富，每年的产量是11．45亿吨，仅农作物秸秆、皮壳一项，每年就可以达7亿吨，其中玉米秸秆占35％，小麦秸秆占21％，稻草占19％，大麦秸秆占1096，高粱秸秆占5％，谷草占5％，燕麦秸秆占3％秸秆占2％，可见，玉米秸秆、小麦秸秆和稻草是中国最主要的三大秸秆。此外，来自于林业副产品、城市垃圾、工业废弃物中的天然纤维素原料数量也相当可观汹。 1纤维素酶简介 目前，纤维素材料除少量用于纺织、造纸和建筑外，人们对其开发利用还相当有限在当今不可再生资源和能源日益枯竭的今天，大力开发和转化利用木质纤维素这些可再生资源则十分必要。纤维素酶在现阶段已经广泛应用于包括食品在内的各个领域，今后还将在应用深度和广度上进一步扩展，现在纤维素酶的应用还存在一些问题，主要是生产菌种的优化问题和应用的成本问题，解决问题的主要方法在于现代生物技术的应用和酶工程的进一步探索，只要解决好这些问题，纤维素酶必将在各领域发挥更大作用。总之，纤维素酶是大有前途的新兴产业，其发展方兴未艾，前景广阔。 1.1纤维素酶的分类 纤维素酶是一类能够降解纤维素生成葡萄糖的酶的总称，它是一类复杂的复合物，称之为纤维素酶系，根据其中各酶功能的差异，可将其分为以下三大类： (1)内切葡聚糖酶： 来自真菌简称EG，来自细菌简称Len．又称为Cl酶，这类酶作用于纤维素内部的非结晶区，随机水解β-1，4-糖苷键，将长链纤维素分子截短，产生大量含非还原性末端的小分子纤维素。 (2)外切葡聚糖酶或纤维二糖酶： 来自真菌简称CBH，来自细菌简称Cex，又称为Cx酶，这类酶作用于纤维素线状分子末端，水解β-1，4-D糖苷键，每次切下1个纤维二糖分子，故又称为纤维二糖水解酶。 (3)β-葡萄糖苷酶：简称BG酶，这类酶将纤维二糖和寡糖水解成葡萄糖分子。 1.2纤维素酶的作用机理 1.2.1几种纤维素酶的作用位点 纤维素酶是—类酶的总称，而非单一的酶。目前在各种酶对纤维素的作用机理上，特别是对Cl-Cx酶假设尚有争议。不过，下述四种酶的存在是众所公认的：(1)内切β-1，4-葡聚糖酶(endo-β1，4-glucanase，EC3．2．1．4，简称EG)。(2)外切β-1，4-葡聚糖酶(exo-β-1，4- glucanase，EC3．2．1．74)。(3)纤维二糖水解酶(cellobiohydrolase，EC3．2．1．91，简称CBH)。(4)纤维二糖酶(cellobiase，E C 3．2．1．21，简称BG)。所谓的Cx酶，系指(1)和(2)。其中纤维二糖水解酶又有内切和外切之分。而C1酶则被认为是(3)。图1-3表示这几种酶的作用位置。 图1-1 各种纤维素酶的作用部位 1.2.2对纤维素分子的吸附作用 纤维素酶对纤维素的降解，一般首先需要吸附到纤维素上，但并不是好的吸附才有好的催化。纤维素酶的吸附不