应用DNA微阵列研究分析斑蝥酸钠诱导K562细胞凋亡前后基因变化.docVIP

2005年中国肿瘤临床年鉴 应用DNA微阵列研究斑蝥酸钠诱导K562细胞凋亡前后的基因变化斑蝥是芫青科昆虫南方大斑蝥或黄黑小斑蝥的干燥全虫。我国很早就有关于斑蝥能抗肿瘤的记载1］ 。现代医学研究证明斑蝥其有效成分是斑蝥素，即斑蝥酸酐，它是斑蝥体内提取的一种单萜类物质，可以抑制癌细胞的核酸代谢及蛋白质的合成，导致癌细胞死亡。但斑蝥素的较大，主要是泌尿道和消化道反应，使它的临床应用受到极大的限制。近来，人们合成了许多斑蝥素的衍生物，如斑蝥素与铂的络合物、去甲斑蝥素、斑蝥酸钠等［2］ ，以降低斑蝥素的反应，增强药物疗效。我们应用DNA微阵列技术，观察了斑蝥酸钠诱导K562细胞凋亡前后细胞基因表达的改变，初步研究斑蝥钠诱导细胞凋亡的分子机制。 　材料和方法 材RPMI1640细胞培养基、Super ScriptⅡ转录酶购自Gibco RBL公司，小牛血清购于四季青公司，噻唑蓝（MTT）购于Sigma公司，二甲基亚砜（）购于上海生物工程公司，Trizol、DNA聚合酶（Taq酶）购于上海博彩生物工程公司，其它常用酶类购于宝生物工程公司。2×预杂交溶液:25% 甲酰胺，5×SSC，0.1% SDS;清洗溶液Ⅰ:2×SSC，0.1% SDS;溶液Ⅱ:0.1×SSC，0.1% SDS;溶液Ⅲ:0.1×SSC。Pixsys 5500芯片打印仪购自Cartesian公司，Scan Array L