HLJ在肝细胞癌组织中的表达及生物学意义教案.pptVIP

HLJ1在肝细胞癌组织中 的表达及生物学意义 参考文献:略 * * 研究生：刘海军 导 师：王志明 单 位：中南大学湘雅医院 2007年11月 第一章 前 言 肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）是严重威胁我国人民健康、临床上最常见的恶性肿瘤之一，具有高度的侵袭转移性，易发生肝内外的复发转移，预后恶劣。据统计全世界每年的新发病例30-100万，死亡病例与发病病例之比几乎达1：1[1]，而我国的肝细胞癌死亡率列全球首位[2]。经数十年不懈努力，肝癌临床研究取得了许多重大进展，部分肝癌病人因早期发现、早期诊断、早期治疗及综合治疗而获得较长期生存，但大部分病人确诊时已属中晚期，失去手术机会；而即使获得手术切除机会的患者其复发、转移率也相当高，加上肝癌本身对放疗、化疗的敏感性甚差，迫切需要研究和发展新的诊疗方法[3]。 随着分子生物学技术的不断发展，肝癌转移复发预测分子水平的研究成为近年研究的重点和热点，进一步研究肝癌转移的基因改变、寻找新的肝癌异常表达或缺失基因发生，从基因水平认识肝细胞的发生、发展和转移的分子机制，从而为早期诊断治疗肝癌，判断预后，实行针对患者个体生物学特点的治疗提供新的方法。 热休克蛋白（Heat shock protein，Hsp）是广泛存在于生物界中具有高度保守性质的蛋白质，在应激状态下可以被诱导表达[4]，根据同源程度及分子量大小可分为Hsp110、Hsp90、Hsp70和Hsp60、Hsp40、小分子Hsp(22～23 kD) 以及泛素等几个家族。热休克蛋白家族在细胞生长、发育、分化、基因转录等功能方面发挥重要的作用，其主要的生物学功能是在应激状态下保护细胞生命活动必需的蛋白质。热休克蛋白与不同功能的多种蛋白质形成复合体，并通过其结合和解离参与靶蛋白的折叠、亚基间装配、细胞内运输及降解，以调节靶蛋白的活性和功能，故热休克蛋白又被称作“分子伴侣”(molecular chaperone)[5-8]。近年发现HSP与肿瘤发生发展、生物学行为及其预后有较密切的关系[9] 。 HLJ1是最新发现的Dnaj类Hsp40家族成员之一，定位于人类染色体1P31.1，HLJ1蛋白由337个氨基酸残基构成，分子量约40kDa，属于Hsp40家族[10]。HLJ1基因内含有一个能驱动其转录活性的区域，序列分析显示此区缺失TATA盒，存在一个CCAAT盒，并有四个转录因子YY1（Yin-Yang-1，又称NF-E1）的结合位点，这对调控HLJ1的表达是非常重要的[11]。 最新的研究证实，HLJ1参与了STAT1和P21WAF1信号路径，能够上调STAT1、P21WAF1的表达，同时下调Cyclin D1的表达[12]。P21WAF1的表达上调和Cyclin D1的表达下调能够减缓细胞分裂和肿瘤细胞的生长[13-17]。此外，HLJ1能上调钙粘蛋白E的表达并能抑制CD44的表达，从而降低细胞的侵袭力[18-19]。Chen等进行了筛选肿瘤侵袭和转移相关基因的实验，用基因芯片技术检测了一个肺癌侵袭性细胞系模型，发现HLJ1跟肿瘤侵袭转移相关。 HLJ1是一个新的抑癌基因，具有抑制细胞生长、增殖、侵袭、迁移，促进凋亡、参与细胞周期调控等作用，并与肿瘤的复发、转移密切相关。但目前国内外有关HLJ1在肝细胞癌中表达情况，HLJ1与肝细胞癌临床病理特征的关系等研究尚未见报道。因而，本课题将研究HLJ1在原发性肝细胞癌中的表达情况及其与肝细胞癌临床病理特征的关系。 第二章 材料和方法 2.1 材料 2.1.1 标本收集及临床病理资料 组织标本取自2005年3月至2006年12月中南大学湘雅医院外科手术切除的32例肝细胞癌组织和32例相对应的癌旁组织（距肿瘤边缘≥2cm），标本离体后迅速取材，一部分置入液氮速冻后转入-70℃超低温冰箱存放。在取材时务必注意避开坏死组织，全部病例均未接受包括肝动脉化疗栓塞术等在内的多种肿瘤治疗。 32例HCC中男性27例，女性5例，年龄27~62岁，中位年龄41岁；其中合并肝硬化的20例（62.5％），无肝硬化的12例（37.5％）；直径大于5cm的共21例（65.6％），小于或等于5cm的共11例（34.4％）；有静脉浸润的16例（50.0％），无静脉浸润的16例（50.0％）；单结节的21例（65.6％），多结节的11例（34.4％）；Edmonson 分级Ⅰ－Ⅱ级的12例（37.5％），Ⅲ－Ⅳ级的20例（62.5％）。所有标本均经病理组织学检查证实诊断。 2.1.2 主要试剂